金鐵鎖種質(zhì)資源的遺傳多樣性評價(jià)及其鯊烯合成酶cDNA的分離、表達(dá)和鑒定.pdf

1、金鐵鎖 (Psammosilene tunicoides W.C.Wu et C.Y.Wu) 系石竹科(Caryophyllaceae) 單種屬植物,為中國西南特有瀕危物種。"云南白藥"的組成藥材,具有較高藥用和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。由于種種原因,金鐵鎖的生存受到威脅,已經(jīng)列入《中國植物紅皮書》中,屬國家二級保護(hù)植物。 為實(shí)現(xiàn)金鐵鎖資源的可持續(xù)利用,本研究應(yīng)用分子標(biāo)記技術(shù)(AFLP)對金鐵鎖種質(zhì)資源遺傳多樣性進(jìn)行了評價(jià),并對其瀕危機(jī)制和保

2、護(hù)策略進(jìn)行了探討；同時(shí)首次進(jìn)行其有效部位(三萜類皂苷)生物合成途徑中關(guān)鍵調(diào)節(jié)酶：金鐵鎖鯊烯合成酶(PSS)的cDNA的分離、原核表達(dá)和功能鑒定等研究,主要結(jié)論如下: 1.在金鐵鎖種質(zhì)資源的遺傳多樣性評價(jià)研究中,表明金鐵鎖物種水平的遺傳多樣性豐富(PPB=86.00﹪,He=0.2831),但其居群水平的遺傳多樣性偏低(PPB=32.5﹪,He=0.0858)；同時(shí)居群間存在顯著的遺傳分化:基因分化系數(shù)Gst=0.6977和Sha

3、nnon's多樣性基因遺傳分化系數(shù) Ist=0.6975。 2.推測金鐵鎖瀕危的主要原因是：(1)為特提斯起源殘余類群；(2)生長環(huán)境的破碎化；(3)自然生長緩慢、分布區(qū)狹窄,加之人類長期以來采挖其根作為藥材；(4)居群間的的基因流(Nm=0.2167)極小,對隔離明顯、居群內(nèi)遺傳多樣性水平偏低的小居群存在較大的威脅。 3.經(jīng)RT-PCR和RACE等方法分離得到金鐵鎖三萜皂苷生物合成途徑中的關(guān)鍵酶基因:鯊烯合成酶全長c