uPAR在肝癌中的表達及其與肝癌侵襲轉(zhuǎn)移關(guān)系研究.pdf

1、目的： 1．研究尿激酶型纖溶酶原激活劑受體（urokinase—type plasminogen activator receptor，uPAR）在肝細胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）組織、癌旁組織及正常肝組織中的表達，結(jié)合HCC的臨床病理因素，探討uPAR與HCC臨床病理因素的關(guān)系。 2．研究uPAR在兩種不同轉(zhuǎn)移能力的HCC細胞系Hep—3B（弱轉(zhuǎn)移能力）和SMMC—7721（強轉(zhuǎn)移能

2、力）中的表達，結(jié)合兩種HCC細胞系體外侵襲轉(zhuǎn)移能力的差別，探討uPAR與HCC細胞系的體外侵襲能力的關(guān)系。 3．研究HCC細胞系SMMC—7721中uPAR+細胞和uPAR—細胞的體外及體內(nèi)侵襲轉(zhuǎn)移能力的差別，進一步探討uPAR的表達對HCC細胞的體內(nèi)體外侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響。 方法： 1．利用免疫組化方法檢測50例HCC及癌旁組織和10例正常肝組織中uPAR的表達，分析其與HCC的臨床病理分級、包膜侵犯、門脈癌栓

3、、腫瘤大小等臨床病理因素的關(guān)系。 2．利用流式細胞技術(shù)檢測HCC細胞系Hep—3B和SMMC—7721中uPAR的表達，通過Boyden小室侵襲實驗比較兩種細胞系體外侵襲能力的差別。 3．利用流式細胞分選技術(shù)從SMMC—7721中分選出uPAR陽性細胞（uPAR+）及陰性細胞（uPAR—），再通過Boyden小室侵襲實驗比較uPAR+組和uPAR—組體外侵襲能力的差別，并通過裸鼠體內(nèi)成瘤及轉(zhuǎn)移模型來比較uPAR+組和uP

4、AR—組的體內(nèi)侵襲轉(zhuǎn)移能力差別。 結(jié)果： 1．uPAR在HCC中呈高表達，而在相應(yīng)的癌旁及正常肝組織的表達則明顯減弱。uPAR的表達和包膜侵犯、門脈癌栓密切相關(guān)（P<0．01），并臨床病理分級相關(guān)，隨著HCC分化的降低，uPAR的表達呈逐步增高的趨勢；而與腫瘤大小、肝硬變程度、性別、肝功能、AFP、HBsAg等因素沒有明顯相關(guān)性（P>0．05）。 2．通過流式細胞技術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)，uPAR在HCC細胞系SMMC—77

5、21中的表達顯著高于Hep—3B中的表達（P<0．01），表達率分別為45．5%和0．05%。體外Boyden小室侵襲實驗發(fā)現(xiàn)，SMMC—7721的體外侵襲能力明顯強于Hep—3B（P<0．01）。 3．從肝癌細胞系SMMC—7721中分選出來的uPAR+組較uPAR一組在Boyden小室侵襲實驗中表現(xiàn)出更強的體外侵襲能力（P<0．01）；通過裸鼠體內(nèi)成瘤及轉(zhuǎn)移實驗，uPAR+組較uPAR一組有著更強的體內(nèi)成瘤和侵襲轉(zhuǎn)移能力（P

6、<0．01）。 結(jié)論： 1． uPAR在HCC中的表達顯著高于相應(yīng)的癌旁及正常肝組織中的表達，提示uPAR的表達是HCC的重要特征；uPAR的表達和臨床病理分級、包膜侵犯、門脈癌栓密切相關(guān)，而與其他因素?zé)o關(guān)，提示uPAR的表達與HCC的惡性生物學(xué)行為密切相關(guān)，uPAR可以作為HCC預(yù)后的有效指標(biāo)。 2．uPAR在具有強轉(zhuǎn)移能力的HCC細胞系SMMC—7721中的表達顯著高于弱轉(zhuǎn)移能力的HCC細胞系Hep—3B中的

7、表達，提示uPAR的表達是強轉(zhuǎn)移能力的HCC細胞系的重要特征；體外侵襲實驗證實SMMC—7721較Hep—3B有著更強的體外侵襲能力，初步說明uPAR的表達與HCC細胞株的體外侵襲能力有關(guān)。 3．從強轉(zhuǎn)移能力的HCC細胞系SMMC—7721中分選出來的uPAR+組較uPAR一組在Boyden小室侵襲實驗中也表現(xiàn)出更強的體外侵襲能力，進一步說明了uPAR的表達賦予了HCC細胞更強的體外侵襲能力；裸鼠體內(nèi)成瘤及轉(zhuǎn)移實驗發(fā)現(xiàn)uPAR+