轉(zhuǎn)GmNFYB基因大豆品系的抗旱性分析.pdf

1、大豆是世界重要的油料作物和植物蛋白及飼料原料。非生物逆境脅迫一直以來(lái)是制約大豆生產(chǎn)的主要因素，干旱造成大豆產(chǎn)量和品質(zhì)降低。研究抗旱相關(guān)基因，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育抗旱新品種，增強(qiáng)大豆對(duì)不良環(huán)境的適應(yīng)性，是保證大豆穩(wěn)產(chǎn)、高產(chǎn)的有效途徑。
　　轉(zhuǎn)錄因子是一類能夠與基因啟動(dòng)子中的順式作用元件發(fā)生特異性結(jié)合的蛋白，通過(guò)與靶基因啟動(dòng)子結(jié)合，激活或者抑制其轉(zhuǎn)錄活性，調(diào)控靶基因在不同細(xì)胞、組織、環(huán)境下特異性表達(dá)。研究表明，許多轉(zhuǎn)錄因子參與干旱、鹽堿

2、等非生物逆境脅迫的調(diào)控，使抗逆相關(guān)基因表達(dá)，提高其抗旱性。
　　NFYB類轉(zhuǎn)錄因子參與并調(diào)控植物體的多種生命活動(dòng)，具有典型的轉(zhuǎn)錄因子特征。目前已經(jīng)在玉米、水稻等農(nóng)作物中克隆出了NFYB基因。研究表明，NFYB基因參與植物多種非生物脅迫應(yīng)答反應(yīng)，NFYB基因顯著增強(qiáng)了植物的抗旱性。
　　本研究利用大豆抗旱轉(zhuǎn)錄因子NFYB，通過(guò)基因的過(guò)量表達(dá)，提高轉(zhuǎn)基因大豆抗逆性。通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)基因大豆品系抗旱表型的觀察、生理指標(biāo)檢測(cè)、產(chǎn)量性狀比較對(duì)

3、NFYB轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)特點(diǎn)進(jìn)行分析，明確轉(zhuǎn)錄因子對(duì)植株抗逆性的影響，從而為大豆抗旱分子育種提供理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)，并創(chuàng)造抗旱性大豆新品系。
　　主要研究結(jié)果如下:
　　1.利用種子芽期抗旱性篩選的方法（北京市地方標(biāo)準(zhǔn)），在PEG高滲溶液中對(duì)轉(zhuǎn)GmNFYB基因的T2代大豆32份株系材料進(jìn)行篩選，其中L-23等11份材料平均發(fā)芽率大于90％（受體品種墾豐16的平均發(fā)芽率為67％）。
　　2.利用草丁膦(PPT)對(duì)11份材料進(jìn)

4、行了除草劑抗性鑒定，受體品種墾豐16可耐受的臨界濃度為100mg/L，轉(zhuǎn)基因材料可抗150 mg/L以上的草丁膦，其中L-23和L-25可耐受300mg/L草丁膦。
　　3.對(duì)11份材料進(jìn)行了PCR鑒定，其中L-23和L-25兩個(gè)株系的后代均擴(kuò)增出目的條帶，純合度相對(duì)最高。
　　4.通過(guò)4％PEG模擬干旱實(shí)驗(yàn)分別對(duì)受體墾豐16、L-23和L-25轉(zhuǎn)基因大豆株系進(jìn)行苗期水分脅迫，6h時(shí)對(duì)照品種墾豐16葉片已經(jīng)萎蔫，而轉(zhuǎn)基因大豆