英夫利昔單抗聯(lián)合甲基強的松龍對大鼠急性脊髓損傷模型Bcl-2、Survivin表達的影響.pdf

1、目的:利用改良Allen's打擊法建立大鼠急性脊髓損傷模型,觀察英夫利昔單抗、甲基強的松龍及英夫利昔單抗聯(lián)合甲基強的松龍對大鼠急性脊髓損傷的治療療效,分析英夫利昔單抗、甲基強的松龍及英夫利昔單抗聯(lián)合甲基強的松龍對損傷段脊髓組織中Bcl-2、Survivin的影響。探討英夫利昔單抗聯(lián)合甲基強的松龍對急性脊髓損傷的保護作用及可能機制。
　　 材料和方法:90只正常成年SD大鼠,同一批次,雄性,體重控制在300-350g,隨機分為6組

2、,正常對照組(Group NC,n=15),假手術(shù)組(Group SO,n=15),安慰劑治療組(Group NS,n=15),甲基強的松龍治療組(Group MP,n=15),英夫利昔單抗治療組(Group IN,n=15),英夫利昔單抗聯(lián)合甲基強的松龍治療組(Group IM,n=15)。除正常對照組不做手術(shù)及治療處理、假手術(shù)組僅作椎板切除外,其余各組均建立急性脊髓損傷(ASCI)模型,并給予相應的藥物治療(甲基強的松龍30mg/k

3、g,腹腔注射;英夫利昔單抗5mg/kg,腹腔注射;單藥治療組給藥一次,藥物聯(lián)合治療組給藥兩次)。采用改良Allen's重物打擊法制作胸10水平急性脊髓中度損傷模型。急性脊髓損傷(ASCI)模型建立成功后,各實驗組立即給予相應的藥物治療,安慰劑治療組經(jīng)腹腔給予注射用生理鹽水2ml,甲基強的松龍治療組給予甲基強的松龍(30mg/kg,腹腔注射,注射劑量為2ml,)一次,英夫利昔單抗治療組(5mg/kg,腹腔注射,注射劑量為2ml)給予英夫利

4、昔單抗一次,英夫利昔單抗聯(lián)合甲基強的松龍治療組給予英夫利昔單抗及甲基強的松龍各一次(英夫利昔單抗,5mg/kg:甲基強的松龍,30mg/kg;腹腔注射:分兩次給藥),正常對照組不予處理,假手術(shù)組于相應時間經(jīng)腹腔給予注射用生理鹽水1ml。每組取5只大鼠對其進行BBB評分,剩余大鼠于脊髓損傷后第24h處死并獲取脊髓標本,檢測指標包括:1.使用免疫組化分析Bcl-2、Survivin表達情況。2.使用RT-PCR分析Bcl-2 mRNA、Su

5、rvivin mRNA表達情況。
　　 結(jié)果:
　　 (1)BBB評分:在傷后14、21天,MP治療組和Infliximab治療組的大鼠BBB評分大于安慰劑治療(p＜0.05),同時MP聯(lián)合Infliximab治療組的大鼠BBB評分又大于MP和Infliximab單獨治療組(p＜0.05)。
　　 (2)免疫組化:在傷后24h,MP治療組和Infliximab治療組表達的Bcl-2和Survivin大于安慰劑治療

6、(p＜0.05),同時MP聯(lián)合Infliximab治療組表達的Bcl-2和Survivin又大于MP和Infliximab單獨治療組(p＜0.05)。
　　 (3)RT-PCR:在傷后24h,MP治療組和Infliximab治療組表達的Bcl-2 mRNA和Survivin mRNA大于安慰劑治療(p＜0.05),同時MP聯(lián)合Infliximab治療組表達的Bcl-2 mRNA和Survivin mRNA又大于MP和Inflix