美洛昔康對(duì)人鼻咽癌CNE-1細(xì)胞株作用的研究.pdf

1、目的：初步探討選擇性環(huán)氧酶-2（COX-2）抑制劑美洛昔康（Meloxicam)對(duì)培養(yǎng)的人鼻咽癌CNE-1細(xì)胞增殖和凋亡的影響及其可能的機(jī)制，分析COX-2抑制劑在鼻咽癌化學(xué)預(yù)防和治療中的應(yīng)用價(jià)值，為今后的動(dòng)物和臨床研究提供可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：選擇CNE-1細(xì)胞為研究對(duì)象，以不同溶度（0、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L）美洛昔康處理CNE-1細(xì)胞不同時(shí)間（24h、48h、72h）后，用MTT法觀

2、察不同溶度、不同時(shí)間美洛昔康作用下CNE-1細(xì)胞的生長(zhǎng)變化；將所選擇藥物作用于CNE-1細(xì)胞后，用AO+EB染色法、流式細(xì)胞儀檢測(cè)法測(cè)定美洛昔康不同溶度作用下不同時(shí)間后細(xì)胞的凋亡情況；采用細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)對(duì)照組和不同溶度美洛昔康作用48h后，CNE-1細(xì)胞內(nèi)COX-2蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1.MTT比色法結(jié)果顯示：美洛昔康對(duì)CNE-1細(xì)胞生長(zhǎng)有顯著的抑制作用，并且呈現(xiàn)出時(shí)間和劑量依賴(lài)性；隨藥物濃度加大和作用時(shí)間

3、延長(zhǎng)，存活細(xì)胞數(shù)量逐漸減少，在高溶度400umol/L時(shí)，48h后細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率高達(dá)50.3％；100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L美洛昔康作用CNE-1細(xì)胞24h，其抑制率分別為8.4%、10.3%、16.4%；100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L美洛昔康作用CNE-1細(xì)胞48h，其抑制率分別為10.4%、28.8%、50.3%；
　　2.AO+EB染色法及流式細(xì)胞檢測(cè)法結(jié)果顯示：用不

4、同濃度的美洛昔康處理CNE-1細(xì)胞后，CNE-1細(xì)胞的凋亡率實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比均表現(xiàn)為不同程度的誘導(dǎo)作用（P<0.05），并且這種誘導(dǎo)作用呈明顯的劑量-時(shí)間依賴(lài)性。AO+EB染色結(jié)果可見(jiàn)明顯的凋亡細(xì)胞存在，凋亡細(xì)胞數(shù)在高濃度美洛昔康組明顯增多，400μmol/L溶度組干預(yù)48h后，200個(gè)細(xì)胞凋亡細(xì)胞達(dá)35±3個(gè)，流式細(xì)胞儀檢查結(jié)果400μmol/L溶度組處理48h后細(xì)胞凋亡率為21.84±0.6%，與對(duì)照組有顯著性差異（p<0.05）

5、；
　　3.細(xì)胞免疫熒光結(jié)果顯示：CNE-1細(xì)胞中COX-2蛋白表達(dá)呈陽(yáng)性率高,美洛昔康作用后,CNE-1細(xì)胞中COX-2蛋白陽(yáng)性的表達(dá)受到抑制,美洛昔康濃度越高,其抑制COX-2表達(dá)的作用越明顯,100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L美洛昔康作用CNE-1細(xì)胞48h后，細(xì)胞內(nèi)COX-2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率分別為39.61±0.34%、30.82±0.67%、23.03±1.12%，與對(duì)照組66.16±1.22%的陽(yáng)