利用單倍體誘導(dǎo)技術(shù)進(jìn)行西葫蘆抗WMV種質(zhì)創(chuàng)新.pdf

1、利用單倍體培養(yǎng)技術(shù)可以快速純合育種中間材料，獲得遺傳穩(wěn)定的自交系，節(jié)約育種時(shí)間與工作量，提高育種速度與效率。本研究分別以五種基因型的西葫蘆一代雜交品種為試材，進(jìn)行未受精子房切片和胚珠的誘導(dǎo)培養(yǎng)，以期建立西葫蘆單倍體誘導(dǎo)體系。研究結(jié)果表明:再生植株率因基因型的不同而有差別，不同培養(yǎng)基對(duì)胚狀體的誘導(dǎo)作用差異明顯，添加物的種類不同其胚狀體誘導(dǎo)率不同，添加水解酪蛋白和酵母提取物的培養(yǎng)基誘導(dǎo)率最高。添加物的濃度對(duì)胚狀體誘導(dǎo)率也存在顯著影響，其中添

2、加水解酪蛋白的培養(yǎng)基胚狀體誘導(dǎo)形成再生植株的能力較高，誘導(dǎo)率可達(dá)66.7％，但是單倍體誘導(dǎo)率僅為2.1％。
　　用氣孔保衛(wèi)細(xì)胞葉綠體計(jì)數(shù)法和流式細(xì)胞儀分析法進(jìn)行再生植株倍性鑒定，結(jié)合特異的EST-SSR標(biāo)記對(duì)再生植株中的單倍體或自然加倍單倍體植株進(jìn)行了快速鑒定分析，共獲得了15株單倍體植株。試驗(yàn)還通過(guò)植株型態(tài)學(xué)觀察法對(duì)再生植株進(jìn)行倍性鑒定分析。
　　西瓜花葉病毒(WMV)是葫蘆科作物的主要病害之一。目前對(duì)該病毒還沒(méi)有好的預(yù)防

3、措施。培育新品種是保障西葫蘆生產(chǎn)安全的有效方法，但是目前西葫蘆抗WMV病毒的品種很少。利用分子標(biāo)記輔助選擇育種可以加快育種進(jìn)度，提高選擇的準(zhǔn)確性。西葫蘆分子標(biāo)記育種起步晚，可利用的標(biāo)記數(shù)量少。本試驗(yàn)結(jié)果表明:西葫蘆抗WMV病毒是由顯性單基因控制的。利用574對(duì)SSR及EST-SSR分子標(biāo)記將該抗病基因遺傳定位在一個(gè)小的連鎖群上，其中，標(biāo)記SSRM137與WMV抗病基因遺傳距離最近，其遺傳距離為1.37cM。
　　利用回交轉(zhuǎn)育技術(shù)得