抑制稻瘟病菌植物源活性物質(zhì)的篩選及分離鑒定.pdf

1、稻瘟病是世界稻區(qū)發(fā)生危害最為嚴(yán)重的病害之一。化學(xué)農(nóng)藥長期使用帶來的環(huán)境安全、食品安全以及病原菌抗藥性的產(chǎn)生已引起人們廣泛關(guān)注，因此，開發(fā)植物源農(nóng)藥用于稻瘟病的防治就顯得尤為重要。本課題對(duì)不同中草藥植物粗提物對(duì)稻瘟病的防治效果進(jìn)行了測定，并從中分離到一種活性物質(zhì)，同時(shí)，初步研究了活性物質(zhì)的作用機(jī)制。 研究選用不同溶劑，采取索式提取法獲得了16種中草藥植物的粗提物，通過離體葉段法測定對(duì)稻瘟病的防治效果。結(jié)果顯示，各粗提物在供試質(zhì)量濃

2、度為10g/L時(shí)，對(duì)稻瘟病的防治效果均在50％以上，其中Wzy、sj、Cp和Bx粗提物效果較高，防效高達(dá)90％以上；Mx、Cyc、Th1、Dc、Hq和Hj粗提物效果次之，防效均大于80％；在供試質(zhì)量濃度為5g/L時(shí)，Mx、Cp、Wzy、等12種植物粗提物的防治效果均在50％以上。 16種植物粗提物進(jìn)行系統(tǒng)分離，共得到266份分離流份，對(duì)所有分離流份采用離體葉段法進(jìn)行生物活性測定，結(jié)果顯示：在供試質(zhì)量濃度為0.33g/L時(shí)，Zzj

3、-1、Sj-2、Cyc-2等34份分離流份的防治效果均高于60％。將防治效果高于60％的流份再進(jìn)行質(zhì)量濃度0.165g/L的進(jìn)一步防效測定，顯示Hq-5的防效最高，達(dá)75.6％；Zzj-3、Cyc-2、Dc-5等7份分離流份防效均在40％以上，其它流份的防效較低。 通過TLC、HPLC、LC-MS分析，Hq-5由Hq-5A、Hq-5B和Hq-5C3種化合物組成，已確定其中2種分別為Chrysin和Wogonin，Hq-5C結(jié)構(gòu)有

4、待進(jìn)一步鑒定。3種化合物的生物活性測定結(jié)果顯示：在質(zhì)量濃度0.165g.L-1時(shí)，Hq-5C對(duì)稻瘟病的防治效果最高，達(dá)70％以上，Hq-5A、Hq-5B的防治效果較低，確定Hq-5C為主要活性物質(zhì)。室內(nèi)毒力測定Hq-5C的EC-50值為150.85mg/L。 通過生長速率法測定Hq-5C對(duì)Fusariumgraminearum、Sclerotiniasclerotiorum、Botrvtiscinerea、Rhizoctonia

5、solani、Bioplarisoryzae、Colletotrichumcocodes6種病原真菌菌絲生長的抑制作用。結(jié)果顯示：在質(zhì)量濃度200mg/L時(shí)除對(duì)Fusariumgraminearum、Sclerotiniasclerotiorum、Botrytiscinerea及Bioplarisoryzae僅有34％～42％的抑菌效果外，對(duì)Rhizoctoniasolani和Colletotrichumcocodes無明顯抑制作用。采

6、用子葉法測定化合物Hq-5C在165mg/L時(shí)，對(duì)黃瓜灰霉病的防治效果高達(dá)88.73％?；衔颒q-5C對(duì)供試其它5種病原菌引起的病害是否具有實(shí)際防治效果尚待進(jìn)一步研究。 經(jīng)組織染色法觀察Hq-5C對(duì)稻瘟病菌作用機(jī)制，結(jié)果表明：接種后8h未發(fā)現(xiàn)對(duì)稻瘟病菌分生孢子的萌發(fā)，附著胞的形成有明顯抑制作用，但是經(jīng)Hq-5B和Hq-5C處理大麥葉片上稻瘟病菌形成的附著胞顏色較對(duì)照淺；接種后36h經(jīng)Hq-5C處理大麥葉片組織內(nèi)稻瘟菌侵染菌絲形