桑樹鈣調(diào)蛋白基因cDNA克隆分析及桑屬植物分子系統(tǒng)學(xué)研究.pdf

1、桑樹是多年生的重要經(jīng)濟(jì)作物，桑葉是家蠶的優(yōu)良飼料。我國作為世界蠶業(yè)的發(fā)祥地和起源中心，擁有世界上最為豐富的桑樹種質(zhì)資源，是一個桑樹資源大國。但是，與其它植物相比，我們在桑樹功能基因克隆等方面都處于落后狀態(tài)。蠶業(yè)作為我國傳統(tǒng)的優(yōu)勢出口創(chuàng)匯產(chǎn)業(yè)，一旦主要桑樹功能基因的控制權(quán)旁落它國，將對我們的桑產(chǎn)業(yè)會造成不可估量的影響。所以，我們應(yīng)該立足于我們的資源優(yōu)勢，開展桑樹功能基因挖掘研究。另外，利用豐富的桑樹種質(zhì)資源開展桑屬系統(tǒng)發(fā)育和分子進(jìn)化研究，

2、對豐富的桑樹遺傳資源收集、整理、保存和創(chuàng)新利用有著重大意義。本文研究內(nèi)容如下： 利用SMART 技術(shù)(Switching Mechanism At 5' end of RNA Transcript)構(gòu)建豐馳桑幼苗cDNA文庫，從中獲得兩個cDNA序列，兩條序列的讀碼框均為450 bp，均包括完整的3'端非翻譯區(qū)；序列比對分析發(fā)現(xiàn)，兩條序列ORF(open reading frame)同源性為86％，核苷酸差異大多數(shù)發(fā)生在第3位密

3、碼子上；將其氨基酸序列與GenBank上登陸的擬南芥ACaM-7等的氨基酸序列進(jìn)行比對，同源性均在98％以上，說明是2個鈣調(diào)蛋白基因，命名為MCaM-1，MCaM-2；其中MCaM-1與擬南芥的CaM7、胡蘿卜的CaM4的氨基酸同源性達(dá)100％。這表明鈣調(diào)蛋白序列在植物中相當(dāng)保守。 用PCR產(chǎn)物直接測序法對?？粕?、構(gòu)屬等屬的14份材料的trnL基因內(nèi)含子序列進(jìn)行了測定：該序列長度變異范圍為534～561 bp；平均核苷酸組成為

4、0.39100(A) 0.27114(T) 0.17679(C) 0.16086(G)，平均A+T含量為0.66214說明該序列富含A/T。利用rps16基因內(nèi)含子對?？粕佟?gòu)屬等屬的20份材料進(jìn)行了分子系統(tǒng)學(xué)研究，各供試材料rps16基因內(nèi)含子長度在887～922 bp之間；平均核苷酸組成為0.36055(A) 0.31305(T) 0.14215(C) 0.18435(G)，平均A+T含量為0.67360，說明該序列富含A/T。用