西北部分地區(qū)草木樨屬根瘤菌多相分類和系統(tǒng)發(fā)育研究.pdf

1、本論文綜述了根瘤菌多樣性、分類和多相分類技術(shù)的研究進(jìn)展；采用表型分析(103項(xiàng)生理生化測定，數(shù)值分類)和遺傳型分析(16S rDNA PCR RFLP，16S rDNA基因全序列分析，nodA和nifH PCR RFLP)等多相分類技術(shù)，對(duì)分離自我國西北部分地區(qū)草木樨屬根瘤菌，首次系統(tǒng)進(jìn)行了多相分類和系統(tǒng)發(fā)育研究。 生理生化測定結(jié)果表明，西北部分地區(qū)草木樨屬根瘤菌能夠利用廣泛的碳氮源，對(duì)抗生素及染料也有較好的抗性。數(shù)值分類中，在

2、92.5％的相似水平上供試菌株分為兩大分支，分支Ⅰ由56株供試菌株與參比菌株S.meliloti組成；分支Ⅱ由CCNWSX0003-1、CCNWSX0003-2、CCNWGS0008、CCNWGS0001-2、CCNWNX0025-15株菌與參比菌株S.medica和S.arboris聚群；菌株CCNWSX0004.1與參比菌株R．leguminosarum在91％的水平上獨(dú)自聚在一起。分支Ⅰ供試菌株在96.4％水平上分為4個(gè)表觀群：群

3、1有23株菌，主要分離自草木樨(Melilotus suaveolens)；群2有17株菌，主要分離自細(xì)齒草木樨(M.dentatus)；群3有6株菌，主要分離自白香草木樨(M.albus)；群4包括3株菌，2株菌寄主為細(xì)齒草木樨(M.dentatus)，1株菌為草木樨(M.suaveolens)。 16S rDNA PCR RFLP分析表明，63株供試菌的酶切圖譜類型組合只有2種。其中類型Ⅰ包括CCNWSX0003-1、CCN

4、WSX0003-2和CCNWSX0004-1，均來自陜西鳳縣唐藏鎮(zhèn)的草木樨植物；類型Ⅱ包括60株供試根瘤菌，分別來源于陜西、甘肅、寧夏不同地區(qū)的草木樨、白香草木樨和細(xì)齒草木樨植物。 16S rDNA基因全序列分析確定了供試草木樨屬根瘤菌代表菌株的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系，分別位于根瘤菌屬(Rhizobium)和中華根瘤菌屬(Sinorhizobium)系統(tǒng)發(fā)育分支。類型Ⅰ的代表菌株CCNWSX0003-1與豌豆根瘤菌(R．leguminos

5、arum)的模式菌株USDA2370序列相似性達(dá)到98.8％，在分類地位上屬于Rhizobium分支；類型Ⅱ的代表菌株CCNWGS0006與草木樨中華根瘤菌(S.meliloti)的16S rDNA相似性為100％，屬于Sinorhizobium分支。 共生基因(nodA 和 nifH)PCR RFLP及其系統(tǒng)發(fā)育學(xué)研究表明，所有供試菌株的nodA基因型有3種，代表菌株CCNWGS0006的nodA基因片段與參比菌株S.meli