馬尾藻多糖分離提取及其免疫藥理學(xué)作用研究.pdf

1、本論文以采自廣西潿洲島的馬尾藻為原料，從馬尾藻多糖的分離提取及其對小鼠和南美白對蝦免疫功能影響等方面做了初步研究，以期為馬尾藻資源的開發(fā)和利用提供科學(xué)依據(jù)。主要研究內(nèi)容如下： 馬尾藻多糖的提取分別采用單一酒精濃度醇沉法，梯度酒精濃度醇沉法和添加101果汁澄清劑醇沉法三種方法，所得多糖做理化性質(zhì)分析，用苯酚一硫酸法測定還原糖含量。通過腹腔注射馬尾藻多糖溶液，用地塞米松制造免疫抑制模型，觀察馬尾藻多糖對小鼠胸腺指數(shù)，脾臟指數(shù)，酸性磷

2、酸酶(ACP)，溶菌酶，超氧化物歧化酶(SOD)，黃嘌呤氧化酶(XOD)，過氧化氫酶(CAT)，一氧化氮水平(NO)和丙二醛(MDA)含量的調(diào)節(jié)作用；將馬尾藻多糖拌入對蝦餌料中，觀察其對南美白對蝦溶菌酶，超氧化物歧化酶，酚氧化酶活性(PO)，酸性磷酸酶和存活率的影響。研究結(jié)果表明： 1.理化性質(zhì)分析、還原糖含量及急性毒性試驗(yàn) Molish試驗(yàn)結(jié)果表明馬尾藻提取物含有多糖成分；碘-碘化鉀反應(yīng)顯示提取物中不含淀粉；茚三酮反應(yīng)表明提取

3、物中無蛋白質(zhì)和氨基酸存在；紅外光譜可見在3420cm-1處有強(qiáng)吸收峰，峰型尖銳，為羥基伸縮振動(dòng)吸收，在1030-1190cm-1處有吸收峰，且裂分為三重峰，為-C-O-C-O-C-基團(tuán)的振動(dòng)偶合，而羥基、-C-O-C-O-C-為多糖特征性結(jié)構(gòu)基團(tuán)，由此可推斷提取物為較純的馬尾藻多糖；單一酒精濃度醇沉法馬尾藻多糖得率為11.83％，純化后含糖量為41-31％；梯度酒精濃度醇沉法產(chǎn)品得率低且質(zhì)量較差；添加101果汁澄清劑醇沉法馬尾藻多糖得率

4、為7.97％，純化后含糖量為68.76％。 2.馬尾藻多糖劑量在100mgkg體重時(shí)，與生理鹽水組比較能顯著提高胸腺指數(shù)(P<0.05)；馬尾藻多糖劑量為50mg/kg體重時(shí)能顯著對抗地塞米松的免疫抑制作用(P<0.05)。 3.馬尾藻多糖能對抗地塞米松的免疫抑制作用，提高免疫抑制小鼠血漿中溶菌酶含量。其中馬尾藻多糖劑量為50mg/kg體重時(shí)可顯著提高免疫抑制小鼠血漿中溶菌酶含量(P<0.05)；馬尾藻多糖劑量為100m

5、g/kg體重時(shí)提高溶菌酶含量作用最明顯(P<0.01)。 4.馬尾藻多糖能顯著降低正常小鼠和免疫抑制小鼠血漿中ACP活力。其中三個(gè)劑量組(50，100或200 mg/kg對正常小鼠血漿中ACP活力均有明顯降低作用(P<0.01)；馬尾藻多糖劑量在100mg/kg和200mg/kg時(shí)，對免疫抑制小鼠血漿中ACP活力有顯著降低作用(P<0.01)。 5.馬尾藻多糖在三個(gè)劑量組(50，100或200 mg/kg)，均能顯著提高

6、正常小鼠脾臟總SOD活力(P<0.05)，但對免疫抑制小鼠脾臟總SOD活力無顯著影響。 6.馬尾藻多糖劑量在100mg/kg或200mg/kg體重時(shí)能顯著降低免疫抑制小鼠胸腺勻漿中XOD活力(P<0.05)，但對正常小鼠胸腺勻漿中XOD活力無顯著影響；馬尾藻多糖劑量在50mg/kg或100mg/kg體重時(shí)能顯著降低免疫抑制小鼠脾臟勻漿中XOD活力(P<0.05)，但對正常小鼠脾臟勻漿中XOD活力無顯著影響。 7.馬尾藻多

7、糖在劑量為200mg/kg體重時(shí)能提高正常小鼠和免疫抑制小鼠胸腺中NO含量(P<0.05)；馬尾藻多糖劑量在100mg/kg體重和200mg/kg體重時(shí)均對正常小鼠脾臟勻漿NO含量有提高作用(P<0.05)；馬尾藻多糖在三個(gè)劑量組(50，100或200mg/kg)，對免疫抑制小鼠脾臟勻漿NO含量也有提高作用(P<0.05)。 8.馬尾藻多糖劑量在50mg/kg體重和100mg/kg體重時(shí)能顯著提高免疫抑制小鼠脾臟CAT活力(P<

8、0.05)，對正常小鼠脾臟CAT活力無顯著影響。 9.馬尾藻多糖劑量在50mg/kg體重和100mg/kg體重時(shí)能夠顯著降低正常小鼠脾臟勻漿MDA含量(P<0.05)，但對免疫抑制小鼠脾臟勻漿MDA含量無顯著影響。 10.馬尾藻多糖在對蝦餌料中的含量為2.0g/kg時(shí)可顯著提高對蝦ACP活性。 11.馬尾藻多糖在餌料中的含量為1.0、1.5或2.0g/kg時(shí)均能增強(qiáng)對蝦PO活性，其中濃度(1.5g/kg)和高濃度

9、組(2.0g/kg)作用達(dá)極顯著(P<0.01)。 12.中濃度組(1.5g/kg)能極顯著地增強(qiáng)對蝦SOD活性(P<0.01)，高濃度組(2.0g/kg)可顯著增強(qiáng)SOD活性(P<0.05)。 13.馬尾藻多糖在餌料中的含量為1.0、1.5或2.0g/kg時(shí)均有增強(qiáng)對蝦溶菌酶活力作用，其中高濃度組(2.0g/kg)作用最明顯(P<0.01)，其它兩組也有顯著提高作用(P<0.05)。 14.馬尾藻多糖能顯著提高