熱休克蛋白10在大腸癌發(fā)生發(fā)展中的表達研究.pdf

1、熱休克蛋白(Heat shock proteins,HSPs)是一組廣泛存在于原核細胞和真核細胞中,于生理應激或病理狀態(tài)下在細胞內合成顯著增加,對生物體在嚴酷環(huán)境下的生存起重要作用,在進化過程中高度保守的多肽類蛋白質的統稱。HSPs的功能主要是作為分子伴侶輔助細胞內蛋白質的合成和折疊,近年來發(fā)現其在腫瘤的生物學行為、腫瘤免疫、腫瘤耐藥性、細胞凋亡、腫瘤的治療和預后等多方面起作用。
　　HSP10是一種小分子 HSPs,存在于線粒體

2、和細胞漿中,其功能主要是輔助線粒體蛋白質的折疊。以下兩個現象提示HSP10與腫瘤之間可能存在著密切的關系:
　　(1)早孕因子(Early pregnancy factor,EPF):EPF于上世紀70年代被發(fā)現存在于早孕婦女的血清中,是一種免疫抑制因子和生長因子,為胚胎發(fā)育早期所必需。后來的研究發(fā)現在惡性腫瘤(膀胱癌、黑色素瘤、絨癌和惡性葡萄胎)患者的血清中也能檢測到EPF,動物實驗發(fā)現EPF與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關。分子生物學證據

3、顯示 HSP10和EPF的氨基酸序列相似、分子量也相似,兩者可能是同一物質在細胞內、外的不同名稱。
　　(2)HSP60:它與HSP10都屬線粒體蛋白,兩者的基因定位在同一條染色體的相同位點上,在結構和功能上緊密相關。已有大量文獻報道HSP60與肺癌、大腸癌、乳腺癌、卵巢癌等多種惡性腫瘤關系密切。所以, HSP10與腫瘤的之間應該存在著密切的關系。
　　本研究應用免疫組化 EnVision二步法和PCR技術,從蛋白質和基因兩

4、個水平檢測HSP10在大腸正常粘膜、腺瘤和腺癌中的表達。分析HSP10在正常粘膜→腺瘤→腺癌;在伴輕、中、重度不典型增生的大腸腺瘤;在高、中、低分化的大腸癌;在伴不同淋巴結轉移狀態(tài)的大腸癌中的表達差異。目的在于研究HSP10在大腸癌發(fā)生、發(fā)展過程中的表達規(guī)律,并初步探討出現這種表達規(guī)律的機制。
　　免疫組化結果顯示:HSP10在大腸正常粘膜、腺瘤和腺癌中均有表達,定位在正常粘膜上皮細胞的胞漿中,在腺瘤、腺癌細胞的胞漿中及胞膜上,在

5、胞膜上的表達較強烈,表現為帶狀濃集現象;HSP10在腺瘤、腺癌中的表達明顯強于正常粘膜,其表達上調出現在大腸癌發(fā)生的早期,即從正常粘膜→輕度不典型增生腺瘤的過程中;在伴輕、中、重度不典型增生的大腸腺瘤,高、中、低分化狀態(tài)的大腸癌,有伴淋巴結轉移和無伴淋巴結轉移的大腸癌中,HSP10的表達差異均無統計學意義。PCR檢測結果顯示HSP10 DNA在大腸腺瘤、腺癌中呈高水平表達。
　　本研究結果表明,HSP10及其DNA在大腸腺瘤、腺癌