缺血后處理對(duì)缺血再灌注大鼠腎臟氧自由基的影響.pdf

1、缺血再灌注損傷（ischemia reperfusion injury，IRI）是指組織器官在缺血的基礎(chǔ)上恢復(fù)血流灌注后，損傷進(jìn)一步加重的現(xiàn)象。一般認(rèn)為缺血再灌注損傷的過(guò)程，是由一種可逆性損傷－缺血損傷，轉(zhuǎn)變?yōu)橐环N不可逆性損傷－再灌注損傷的過(guò)程。缺血再灌注損傷的機(jī)制與細(xì)胞內(nèi)鈣超載、大量氧自由基的產(chǎn)生、凋亡基因活化和線粒體功能受損等因素有關(guān)[1]，其中再灌注后爆發(fā)式產(chǎn)生的氧自由基是引起細(xì)胞生物分子結(jié)構(gòu)變化和細(xì)胞功能損傷的重要原因之一[2]

2、。缺血后處理（ischemic postconditioning，IPO）是近幾年提出的一種減輕缺血再灌注損傷的新方法，是指在組織、器官缺血恢復(fù)血供之前，給予的短暫、數(shù)次的再灌注－缺血的處理過(guò)程。既往研究表明缺血后處理可對(duì)心、腦、肝、腎[3-5]等器官的再灌注損傷產(chǎn)生保護(hù)作用，然而其保護(hù)作用的機(jī)制有待進(jìn)一步闡明。川芎嗪具有很強(qiáng)的抗氧化作用，在對(duì)缺血再灌注損傷的防治中其保護(hù)作用已被實(shí)驗(yàn)證實(shí)[6]。本研究在大鼠腎臟缺血再灌注損傷及缺血后處理

3、模型的基礎(chǔ)上，通過(guò)觀察缺血后處理在不同時(shí)間對(duì)大鼠缺血再灌注腎臟氧自由基的影響，并通過(guò)與川芎嗪的干預(yù)效果進(jìn)行比較，來(lái)探討缺血后處理的保護(hù)作用及可能機(jī)制。
　　目的:
　　建立大鼠腎臟缺血后處理模型，觀察缺血后處理在不同時(shí)間對(duì)缺血再灌注大鼠腎組織氧自由基的影響，并在再灌注損傷最嚴(yán)重時(shí)將缺血后處理同川芎嗪治療進(jìn)行比較，探討缺血后處理對(duì)大鼠腎組織氧化損傷的影響及可能機(jī)制。
　　方法:
　　1、建立缺血后處理動(dòng)物模型：結(jié)扎

4、大鼠右側(cè)腎蒂同時(shí)阻斷左側(cè)腎動(dòng)脈45min以造成腎臟的缺血，在再灌注之前進(jìn)行反復(fù)10次的恢復(fù)血供20s－阻斷血供20s的處理，以此來(lái)完成動(dòng)物模型的制作。
　　2、72只SD雌性大鼠隨機(jī)分為3組，每組24只，即假手術(shù)組（S組），缺血再灌注組（IR組），缺血后處理組（IPO組），各組進(jìn)一步分成8個(gè)時(shí)間亞組（0.5h、1h、3h、6h、12h、24h、48h、72h組）。留取各組大鼠血液、腎組織標(biāo)本，檢測(cè)腎功能（BUN、Cr）指標(biāo)及腎組織

5、氧化損傷（SOD、MDA、CAT、TAC、GSH-PX）指標(biāo)的變化。
　　3、32只SD雌性大鼠隨機(jī)分為4組，每組8只，假手術(shù)組（S組），缺血再灌注組（IR組），川芎嗪治療組（I/R+T組），缺血后處理組（IPO組）,各組動(dòng)物在術(shù)后24h采取血液、腎組織標(biāo)本。檢測(cè)腎功能（BUN、Cr）及腎組織中氧化損傷（SOD、MDA、CAT、TAC）指標(biāo)的變化。
　　結(jié)果:
　　缺血后處理組大鼠血清BUN值與缺血再灌注組相比，于再灌

6、注后6h（10.69±4.16vs18.51±1.60mmol/L）、12h（15.77±0.91vs24.69±7.46mmol/L）、24h（8.02±0.61vs30.97±9.96mmol/L）均明顯降低（P<0.05）；血清Cr值較缺血再灌注組于再灌注后6h（51.6±24.6vs93.3±21.3μmol/L）、12h（44.6±3.5vs142.3±66.6μmol/L）、24h（44.0±4.5vs238.3±54.2μ

7、mol/L）均明顯降低（P<0.05）。
　　在再灌注后3h，缺血后處理組較缺血再灌注組SOD值（90.13±5.17vs82.65±0.92U/mgprot）、CAT值（21.67±0.94vs20.09±0.26U/mgprot）、TAC值（4.05±0.13vs3.54±0.10U/mgprot）明顯升高（P<0.05），MDA值（7.92±0.76vs9.21±0.61nmol/mgprot）明顯降低（P<0.05）。在再

8、灌注后6h，缺血后處理組較缺血再灌注組SOD值（89.34±2.80vs79.61±0.76U/mgprot）、CAT值（21.63±1.10vs19.31±1.00U/mgprot）、TAC值（3.87±0.14vs3.43±0.08U/mgprot）明顯升高（P<0.05），MDA值（8.41±0.43vs10.13±0.77nmol/mgprot）明顯降低（P<0.05）。在再灌注后12h，缺血后處理組較缺血再灌注組SOD值（92

9、.78±2.47vs73.81±0.85U/mgprot）、CAT值（20.57±1.04vs18.12±0.37U/mgprot）、TAC值（3.78±0.14vs3.22±0.04U/mgprot）明顯升高（P<0.05），MDA值（8.66±0.48vs10.53±0.96nmol/mgprot）明顯降低（P<0.05）。在再灌注后24h，缺血后處理組較缺血再灌注組SOD值（90.21±1.83vs72.29±3.28U/mgpr

10、ot）、CAT值（19.64±0.52vs17.79±0.22U/mgprot）、TAC值（3.67±0.23vs3.17±0.17U/mgprot）明顯升高（P<0.05），MDA值（8.96±0.21vs10.71±0.13nmol/mgprot）明顯降低（P<0.05）。缺血后處理組GSH-Px值較缺血再灌注組于再灌注后1h（99.77±1.64vs96.60±1.09U/mgprot）、3h（92.22±5.32vs84.44±

11、1.22U/mgprot）、6h（87.80±6.50vs77.83±2.27U/mgprot）、12h（97.76±4.91vs86.67±1.07U/mgprot）均明顯升高（P<0.05）。
　　在再灌注24h，川芎嗪治療組與缺血后處理組大鼠的BUN、Cr、SOD、MDA、CAT和TAC值均無(wú)顯著差異（P>0.05）。
　　結(jié)論:
　　大鼠腎臟缺血再灌注后氧化損傷程度隨再灌注時(shí)間延長(zhǎng)逐漸加重，且于再灌注后24h損