京海黃雞FSHβ和FSHR基因的遺傳效應(yīng)及其表達(dá)規(guī)律研究.pdf

1、傳統(tǒng)育種方法在家禽的很多重要經(jīng)濟性狀中取得了巨大的進展，但耗時耗力。近些年來，在家禽育種中采用了分子生物技術(shù)，候選基因法是一種較常用的方法，以期找到與經(jīng)濟性狀變異相關(guān)的數(shù)量性狀座位(quantitative trait locus，QTL)。作為重要的經(jīng)濟性狀，體重和繁殖性狀都是由繁雜的遺傳和環(huán)境因素控制，所以研究家禽生長和繁殖的分子機制，可用于選擇家禽重要的經(jīng)濟性狀。本研究采用PCR-SSCP技術(shù)檢測京海黃雞促卵泡激素(follicl

2、e-stimulating hormone，F(xiàn)SH)β亞基基因及其受體(follicle-stimulating hormonereceptor，F(xiàn)SHR)基因的多態(tài)性，并研究SNPs與生產(chǎn)性狀的關(guān)系;使用RQ-PCR法研究京海黃雞FSHβ和FSHR基因的表達(dá)譜及表達(dá)規(guī)律。主要研究結(jié)果如下:
　　1.檢測FSHβ基因的全部外顯子，分析其單核苷酸多態(tài)性。結(jié)果顯示FSHβ基因僅外顯子3存在多態(tài)性，其中相鄰的C2049T和A2050T突

3、變，形成AA、AB和BB3種基因型;T2341C突變形成CC、CD和DD3種基因型;A2467C突變形成EE、EF和FF3種基因型。關(guān)聯(lián)分析結(jié)果顯示12周齡體重AB基因型顯著高于BB基因型(P＜0.05)、EF基因型顯著高于EE基因型(P＜0.05);2周齡體重CC基因型極顯著高于CD基因型(P＜0.01);并且以上突變對繁殖性狀無顯著影響。因而可知，在生長性狀方面，AB、CC和EF基因型為京海黃雞的優(yōu)勢基因型，可初步推斷FSHβ基因?qū)?/p>

4、京海黃雞的生長有一定的促進作用。
　　2.檢測FSHR基因的外顯子1和10，分析其單核苷酸多態(tài)性。結(jié)果顯示FSHR基因外顯子1處存在C159T突變，形成AA、AB和BB三種基因型;FSHR基因外顯子10處存在C75429T的點突變，形成三種基因型CC、CD和DD。關(guān)聯(lián)分析結(jié)果顯示京海黃雞2周齡體重AB基因型極顯著高于BB基因型(P＜0.01)、AA基因型顯著高于BB基因型(P＜0.05);6周齡體重AA和AB基因型都顯著高于BB基

5、因型(P＜0.05)、CD基因型顯著高于CC基因型(P＜0.05);開產(chǎn)日齡CC和CD基因型顯著早于DD基因型(P＜0.05);300日齡產(chǎn)蛋數(shù)AB基因型顯著高于AA基因型(P＜0.05);其余差異不顯著。
　　3.對京海黃雞FSHβ基因在不同生長階段和組織中的表達(dá)規(guī)律進行研究。結(jié)果顯示FSHβ基因在不同組織中均有一定的表達(dá)量，其中性腺和垂體的表達(dá)水平最高，在0-20周齡，F(xiàn)SHβ基因mRNA表達(dá)豐度在20周。FSHβ基因在公母雞

6、上的表達(dá)趨勢是一樣的，在垂體中初生時相對表達(dá)量幾乎為零，到4周齡有小幅度上升的趨勢，從4周齡到16周齡表達(dá)量有很大的提高，母雞20周齡達(dá)到最高，即從4周齡到20周齡FSHβ基因的表達(dá)呈直線上升。在卵巢中初生時有少量表達(dá)，然后到4周齡降到最低之后趨于穩(wěn)定。另外，4周齡和16周齡時FSHβ基因在母雞性腺和垂體中的相對表達(dá)量均高于公雞。
　　4.對京海黃雞FSHR基因在不同生長階段和組織中的表達(dá)規(guī)律進行研究。結(jié)果顯示FSHR基因在性腺表