納米金生物探針及硫化銅膜在生物傳感器中的一些應(yīng)用.pdf

1、納米粒子由于其特有的性質(zhì)及巨大應(yīng)用前景，已成為科學(xué)研究的熱點(diǎn)。近年來，納米技術(shù)逐步進(jìn)入生物傳感器領(lǐng)域，為生物傳感器的發(fā)展提供了無窮的想象?？偟恼f來，納米顆?？梢詮V泛地應(yīng)用于敏感分子的固定，信號的檢測和放大，待測物質(zhì)的富集和濃縮。本文首先研究了利用金納米粒子標(biāo)記寡核苷酸和羊抗人免疫球蛋白G(IgG)生物探針分別檢測了單堿基突變和人IgG，最后研究了基于硫化銅納米膜的電容型免疫傳感器。具體內(nèi)容包括以下幾個方面： 第一部分：提出了一種

2、基于自組裝和使用金標(biāo)抗體和絡(luò)合物雙重放大檢測信號的方法提高壓電免疫傳感器的靈敏度。通過自組裝方法在石英晶體微天平(QCM)的金電極表面組裝一層葡萄糖球菌蛋白A(PA)，再在生成的膜上面組裝一層羊抗人IgG充當(dāng)傳感界面。在傳感界面與人IgG反應(yīng)后，分別利用金標(biāo)抗體和免疫絡(luò)合物作為一級放大標(biāo)記物和二級放大標(biāo)記物雙重放大人IgG的檢測信號。為了提高靈敏度，對絡(luò)合物的組成和金標(biāo)抗體的稀釋倍數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該傳感器能在10.9ng/mL

3、～10.9μg/mL范圍內(nèi)對人IgG進(jìn)行測定。與傳統(tǒng)的壓電免疫分析比較，這種質(zhì)量放大方法的靈敏度和檢測下限均有較大提高。 第二部分：設(shè)計(jì)一鎖掛探針檢測結(jié)直腸癌相關(guān)的K—碎片基因密碼子12的單堿基突變。只有與目標(biāo)鏈完全匹配時，鎖掛探針才能被大腸桿菌連接酶連接。環(huán)化的鎖掛探針和用引物與之雜交后，通過φ29聚合酶延伸引物得到由與鎖掛探針互補(bǔ)的堿基單元組成的DNA單鏈，最后利用13nm納米金顆粒標(biāo)記的巰基化寡核苷酸與RCA產(chǎn)物雜交后，通