植物氣味對(duì)綠盲蝽性趨向的調(diào)控與氣味結(jié)合蛋白AlucOBP8的識(shí)別功能.pdf

1、隨著轉(zhuǎn)Bt基因棉花大量種植，綠盲蝽(Apolygus lucorum)現(xiàn)已成為中國(guó)棉田的重要害蟲(chóng)，且因?yàn)槠浼闹鲝V泛、轉(zhuǎn)移寄主為害和活動(dòng)能力強(qiáng)等特點(diǎn)而難以治理。隨著推-拉(Push&Pull)策略為代表的害蟲(chóng)綜合治理體系的應(yīng)用，利用性信息素防治綠盲蝽成為一種潛在的新方法，而這便要求人們能夠從室內(nèi)行為水平和分子水平對(duì)綠盲蝽的信息素通訊機(jī)制進(jìn)行解析。本研究從這兩個(gè)方面入手，對(duì)以綠盲蝽為代表的盲蝽科害蟲(chóng)感受性信息素的嗅覺(jué)機(jī)制開(kāi)展了初步探究，以期

2、為今后深入研究提供參考。
　　本試驗(yàn)主要研究?jī)?nèi)容如下:
　　1.基于當(dāng)前盲蝽科性信息素組分鑒定困難、人工合成組分活性不高以及室內(nèi)行為反應(yīng)不敏感等問(wèn)題，本試驗(yàn)在室內(nèi)利用H形嗅覺(jué)儀對(duì)綠盲蝽雄蟲(chóng)識(shí)別性信息素的過(guò)程中寄主植物揮發(fā)物的作用進(jìn)行了初步探究。本研究發(fā)現(xiàn)在行為水平上，綠盲蝽雄蟲(chóng)對(duì)以3∶2的4-氧代-反-2-己烯醛和丁酸-反-2-己烯酯組成的性誘芯反應(yīng)不敏感（P=0.5371），在性信息素中添加棉花揮發(fā)物后發(fā)現(xiàn)綠盲蝽雄蟲(chóng)依然對(duì)

3、性信息素不敏感(P=0.4838)。然后，用棉花對(duì)綠盲蝽雄蟲(chóng)進(jìn)行飼養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)雄蟲(chóng)對(duì)添加了棉花揮發(fā)物的性信息素誘芯產(chǎn)生選擇偏好性（P=0.0022），而只用棉花飼養(yǎng)的綠盲蝽雄蟲(chóng)則對(duì)沒(méi)有棉花揮發(fā)物的性信息素組分不敏感（P=0.5002）。這表明植物揮發(fā)物在綠盲蝽尋找配偶的過(guò)程中具有重要的第一步信使功能。在此基礎(chǔ)之上，本試驗(yàn)又用不同寄主對(duì)綠盲蝽雄蟲(chóng)進(jìn)行了飼養(yǎng)，在植物揮發(fā)物存在的背景下，試驗(yàn)結(jié)果表明用綠盲蝽田間重要寄主棉花、黃花蒿和紫花苜蓿飼養(yǎng)的

4、綠盲蝽雄蟲(chóng)對(duì)性信息素趨性明顯(P＜0.05)，而非常見(jiàn)寄主四季豆和玉米穗飼養(yǎng)的綠盲蝽雄蟲(chóng)則對(duì)性信息素不敏感（P＞0.10）。該試驗(yàn)結(jié)果不僅解釋了綠盲蝽性信息素在田間可以大量誘捕到雄蟲(chóng)，而在室內(nèi)卻難以引起性趨向反應(yīng)這一現(xiàn)象，同時(shí)也表明以綠畝蝽為代表的盲蝽科昆蟲(chóng)在與自然環(huán)境的協(xié)同進(jìn)化過(guò)程中，對(duì)周邊寄主存在的感知成為盲蝽雄蟲(chóng)主動(dòng)尋找配偶并完成繁衍行為的前提和基礎(chǔ)。
　　2.本試驗(yàn)對(duì)在綠盲蝽觸角中特異性表達(dá)的一個(gè)氣味結(jié)合蛋白AlucOBP

5、8進(jìn)行了克隆、表達(dá)和純化，通過(guò)體外的熒光競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合試驗(yàn)，我們對(duì)其與7種性信息素類(lèi)似物和33種植物揮發(fā)物的結(jié)合能力進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果表明AlucOBP8均不能與7種性信息素組分有效結(jié)合，但可以有效結(jié)合葎草烯和十二醛兩種植物揮發(fā)物，這兩種化合物與AlucOBP8的結(jié)合常數(shù)分別為8.74μmol/L和9.99μmol/L。隨后，我們?cè)谑覂?nèi)利用H形嗅覺(jué)儀進(jìn)行了綠盲蝽雌雄成蟲(chóng)對(duì)萑草烯和十二醛這兩種化合物的嗅覺(jué)選擇趨向試驗(yàn)，結(jié)果表明這兩種化合物均不能引