塞來(lái)昔布調(diào)控PI3K-Akt信號(hào)通路抑制肝癌細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　探討塞來(lái)昔布（Celecoxib）抑制肝癌細(xì)胞株HepG-2細(xì)胞增殖的分子機(jī)制。
　　方法：
　　提取非同一濃度的Celecoxib(0umol/L、6.25umol/L、12.50umol/L、25.00umol/L、50.00umol/L、100.00umol/L)對(duì)肝癌細(xì)胞 HepG-2進(jìn)行處理，采用MTT比色法檢測(cè)腫瘤細(xì)胞分別在24h、48h、72h的凋亡情況，觀察塞來(lái)昔布在體外作用于人肝癌細(xì)胞對(duì)其

2、細(xì)胞增殖的影響。運(yùn)用 Western blot技術(shù)，觀察HepG-2細(xì)胞經(jīng)塞來(lái)昔布處理后對(duì)磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）和磷酸化的蛋白激酶-B（p-Akt）及其下游產(chǎn)物Caspase-9、Caspase-3在不同濃度情況下蛋白表達(dá)量的變化。
　　結(jié)果：
　　1.隨著Celecoxib作用時(shí)間的延長(zhǎng)及藥物劑量的增加，其抑制HepG-2細(xì)胞增殖的作用明顯增強(qiáng)，藥物劑量為6.25umol/L時(shí)24h的抑制率為11.50％。72h的

3、抑制率為30.15％。藥物劑量為100.00umol/L時(shí)24h的抑制率為46.79％。72h的抑制率為74.28％（P＜0.01），且呈明顯劑量依賴(lài)及時(shí)間依賴(lài)性。
　　2.Celecoxib在隨著藥物濃度增加后，PI3K、p-Akt的蛋白表達(dá)量逐漸下降。Celecoxib作用72h后，PI3K在各濃度蛋白相對(duì)表達(dá)量分別為1.62、1.43、1.09、0.79、0.59。p-Akt在各濃度蛋白相對(duì)表達(dá)量分別為0.86、0.81、0

4、.72、0.58、0.30（P＜0.05）。而其下游的Caspase-9在Celecoxib作用72h后，各濃度蛋白的相對(duì)表達(dá)量分別為0.71、0.98、1.21、1.48、1.72。Caspase-3在Celecoxib作用72h后，各濃度蛋白的相對(duì)表達(dá)量分別為0.80、1.34、1.48、1.74、2.22（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.Celecoxib能抑制人肝癌細(xì)胞HepG-2的增殖。
　　2.Cel