大鼠下頜骨牽張成骨蛋白質(zhì)組學(xué)初步分析.pdf

1、牽張成骨(DistractionOsteogenesis,DO),是指在已截開(kāi)的骨段間或在骨縫處通過(guò)安置牽張裝置,施加牽引力,牽開(kāi)骨斷端,在因此產(chǎn)生的骨間隙中形成新生骨組織,以達(dá)到骨延長(zhǎng)及骨增寬的目的。目前,隨著牽張成骨技術(shù)的成熟和完善,此技術(shù)得到了越來(lái)越多的地應(yīng)用,尤其是在糾正頜面部畸形及修復(fù)骨缺損的的治療方面得到了廣泛的肯定。隨著實(shí)驗(yàn)研究的深入及發(fā)展,促進(jìn)牽張成骨新骨形成的辦法愈來(lái)愈多,但牽張成骨新骨形成的機(jī)理上存在很多疑問(wèn),觀點(diǎn)上

2、也存在一定分歧。后基因組時(shí)代,功能基因組的研究已經(jīng)逐漸取代遺傳信息的揭示成為了研究的重點(diǎn)。蛋白質(zhì)是生物功能最為主要的體現(xiàn)者,而其自身有著特有的活動(dòng)規(guī)律,例如蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化、轉(zhuǎn)運(yùn)定位、修飾加工、蛋白質(zhì)與其他生物大分子的相互作用等,在基因水平的研究是無(wú)法獲得的。正因如此,對(duì)細(xì)胞及機(jī)體蛋白質(zhì)組成及其活動(dòng)規(guī)律從整體水平進(jìn)行探討,成為了人們迫切的愿望。蛋白質(zhì)組是整體概念,隨著時(shí)間空間變化而發(fā)生動(dòng)態(tài)變化。只有開(kāi)展蛋白質(zhì)組學(xué)研究,即對(duì)所有蛋白質(zhì)總和進(jìn)

3、行研究,才能更好地揭示生命活動(dòng)的本質(zhì)和發(fā)現(xiàn)生命活動(dòng)的規(guī)律,才能更好地掌握生命現(xiàn)象和本質(zhì)的。本研究的主要目標(biāo)是建立大鼠下頜骨牽張成骨的動(dòng)物模型,對(duì)其牽張區(qū)域內(nèi)的新生組織進(jìn)行總蛋白的提取,蛋白質(zhì)定量,運(yùn)用iTRAQ技術(shù)進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析,分析大鼠下頜骨牽張成骨過(guò)程中新生組織蛋白表達(dá)的改變,從整體水平探討其新生骨組織的蛋白質(zhì)變化,為闡明揭示下頜骨牽張成骨的機(jī)制提供理論依據(jù)。全文分為2部分:
　　1大鼠下頜骨牽張成骨新生骨組織蛋白質(zhì)定量實(shí)

4、驗(yàn)研究
　　目的:建立大鼠下頜骨牽張成骨模型,對(duì)牽張區(qū)域新生組織進(jìn)行總蛋白提取及蛋白質(zhì)定量。方法:以6只雄性SD大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,行單側(cè)下頜骨牽張成骨,隨機(jī)分為2組,每組3只,分別于固定期第1d(A組)及14d(B組)取材,對(duì)其牽張區(qū)域總蛋白提取及蛋白質(zhì)定量檢測(cè),應(yīng)用SPSS12.0軟件包進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)。結(jié)果:成功提取大鼠下頜骨牽張成骨牽張區(qū)域新生組織標(biāo)本,測(cè)定A組3個(gè)蛋白質(zhì)樣本與B組3個(gè)蛋白質(zhì)樣本的蛋白質(zhì)濃度(R=0.984),測(cè)

5、量結(jié)果運(yùn)用SPSS12.0軟件進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn),P<0.01。結(jié)論:大鼠下頜骨牽張成骨牽張區(qū)域新生組織固定期第1d較固定期14d,總蛋白表達(dá)含量明顯升高,提示在牽張成骨早期,蛋白質(zhì)表達(dá)活躍,為下一步蛋白質(zhì)組學(xué)分析奠定了基礎(chǔ)。
　　2大鼠下頜骨牽張成骨新生骨組織蛋白質(zhì)組學(xué)初步分析
　　目的:探討用蛋白質(zhì)組學(xué)iTRAQ技術(shù)分析大鼠下頜骨牽張成骨過(guò)程中新生組織蛋白表達(dá)的改變。方法:應(yīng)用iTRAQ技術(shù)對(duì)實(shí)驗(yàn)一下頜骨牽張成骨新生組織的蛋