廣西產(chǎn)何首烏有效成分分離純化及生物活性研究.pdf

1、本文主要從以下幾部分展開： 第一部分： 目的：分離純化制首烏醇提物的正丁醇萃取物：并初步探討各流份對人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞增殖的影響。方法：采用聚酰胺柱色譜分離純化何首烏醇提取物的正丁醇萃取物；應(yīng)用IR、1H-NMR、13C-NMR對分離出的化合物進行結(jié)構(gòu)鑒定；MTT比色法檢測何首烏提取物正丁醇萃取物聚酰胺柱層析流份對人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞生長的作用；HE染色法觀察其流份對人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞作用的形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果：利用聚酰

2、胺柱色譜技術(shù)，經(jīng)過乙醇水梯度洗脫，分離獲得5種流份，流份A經(jīng)硅膠柱層析分離得化合物Ⅰ(結(jié)構(gòu)待定)。經(jīng)聚酰胺柱層析洗脫的五種流份對人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞增殖具有不同的作用，其中E流份隨著濃度的增加，對人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞增殖具有促進作用，顯微鏡下觀察到細胞的數(shù)量及分裂相增多。C和D流份對細胞的增殖影響不大，而B流份對血管內(nèi)皮細胞具有抑制生長作用，細胞的數(shù)量減少，核固縮。結(jié)論：聚酰胺柱色譜對何首烏提取物的多酚羥基類物質(zhì)具有一定的分離效果；制首

3、烏提取物聚酰胺柱層析流份中含有促人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞生長的活性物質(zhì)。 第二部分： 目的：分離純化生首烏水提物的乙酸乙酯萃取物；并初步探討無細胞毒性的流份對組蛋白去乙?；富钚缘挠绊憽７椒ǎ悍謩e采用大孔吸附樹脂D101柱、羥丙基葡聚糖凝膠柱、重結(jié)晶等方法分離純化生首烏水提取物的乙酸乙酯萃取物；通過MTT法觀察流份的細胞毒性；酶聯(lián)吸附免疫法(ELISA)測定無細胞毒性的流份對人組蛋白去乙?；?HDAC)活性的影響。結(jié)果：利

4、用大孔樹脂D101柱色譜技術(shù)，經(jīng)過不同濃度的乙醇梯度沈脫，分離獲得A、B、C、D、E、F 6種流份。再將C流份過羥丙基葡聚糖凝膠柱，分離得到4種流份C1、C2、C3、C4。其中C1重結(jié)晶得到1個化合物，經(jīng)紅外核磁共振光譜初步鑒定為兒茶素。選用無細胞毒性的流份C、C2、C3進行抑制組蛋白去乙酰化酶活性研究，其中流份C2、C3隨著濃度的增加，對鼻咽癌CNE-1細胞的組蛋白去乙酰化酶活性具有一定的抑制作用，而未經(jīng)羥丙基葡聚糖凝膠柱分離的C流份