EGCG對(duì)鎘誘導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷的保護(hù)作用.pdf

1、本文通過采用人肝正常細(xì)胞(HL-7702)的體外實(shí)驗(yàn)來探討表沒食子兒茶素沒食子酸酯(Epigallocatechin Gallate，EGCG)對(duì)鎘(Cd)誘導(dǎo)肝細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。研究采用MTT比色法檢測(cè)鎘的細(xì)胞毒性及EGCG對(duì)細(xì)胞活力的影響；Hoechst33258染色實(shí)驗(yàn)和瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)細(xì)胞凋亡水平；紫外-可見全波段掃描檢測(cè)(UV-Vis)及核磁共振(NMR)譜分析EGCG與鎘離子之間的化學(xué)反應(yīng)；DCFH-DA染色后通

2、過熒光分光光度儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基(ROS)水平。研究結(jié)果如下：
　　 1.鎘處理后HL-7702細(xì)胞活力顯著性降低(P＜0.05)，而且細(xì)胞內(nèi)ROS含量顯著上升(P＜0.01)；并且Hoechst33258染色實(shí)驗(yàn)和瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)結(jié)果顯示鎘誘導(dǎo)DNA產(chǎn)生了明顯的凋亡片段并誘導(dǎo)了細(xì)胞凋亡。
　　 2.使用不同濃度的EGCG(50、100、200μM)對(duì)鎘(80μM)預(yù)處理48 h的肝細(xì)胞分別進(jìn)行3 h的干預(yù)后可以

3、使受損細(xì)胞的細(xì)胞活力得到不同程度的修復(fù)，修復(fù)率分別為13.8％、33.9％和71.4％。與此同時(shí)，EGCG對(duì)鎘誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)的ROS含量也具有明顯的清除作用(P＜0.01)。
　　 3.紫外-可見全波段掃描及核磁共振結(jié)果顯示EGCG和鎘離子(Cd2+)可能發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。
　　 本研究結(jié)果表明，EGCG與Cd2+可能發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，但是對(duì)于受到鎘損傷的HL-7702細(xì)胞，EGCG的保護(hù)機(jī)制主要是通過清除細(xì)胞內(nèi)鎘誘導(dǎo)產(chǎn)生的ROS