EES、VPA對LPS海馬C-fos蛋白表達(dá)影響及意義的研究.pdf

1、目的：通過建立氯化鋰—匹羅卡品癲癇（Lithium—Pilocarpine Seizures，LPS）慢性大鼠點(diǎn)燃模型，觀察造模后Spague—Dawley（SD）大鼠點(diǎn)燃的成功率、存活率，及其影響因素；應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法觀察C—fos蛋白免疫反應(yīng)陽性表達(dá)細(xì)胞在LPS各研究時(shí)間點(diǎn)大鼠海馬CA1、CA2、CA3、齒狀回（Dentate Gyrus，DG）及齒狀回前區(qū)（poDG）的表達(dá)，以及經(jīng)全蝎醇提物（ethanol extractiv

2、e of scorpion，EES）不同劑量級、丙戊酸（valproic acid，VPA）干預(yù)后對C—fos免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞表達(dá)的影響及意義；探索C—fos蛋白在癲癇發(fā)病機(jī)制中的作用和EES可能的抗癲癇作用機(jī)制。 方法：（1）清潔級健康成年雄性SD大鼠295只，除正常對照組6只外，其余289只均造模。（2）對造模成功的模型鼠隨機(jī)分組，分別為模型對照組、VPA干預(yù)組、EES不同劑量級干預(yù)組（EES低劑量干預(yù)組、EES中劑量干預(yù)組

3、、EES高劑量干預(yù)組）；（3）在不同時(shí)間點(diǎn)運(yùn)用免疫組織化學(xué)技術(shù)觀察上述各組大鼠腦內(nèi)海馬各區(qū)C—fos蛋白免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞的表達(dá)。 結(jié)果：（1）經(jīng)反復(fù)多次小劑量注射匹羅卡品（Pilocarpine，Pilo）后總點(diǎn)燃率為93.77%（271/289），達(dá)到SE發(fā)作為85.47%（247/289），造模時(shí)死亡率為4.85%（14/289）；（2）在藥物干預(yù)實(shí)驗(yàn)過程中實(shí)際使用LPS慢性模型鼠239只，30d慢性觀察期內(nèi)經(jīng)不同的干預(yù)處理

4、后有23只模型鼠死亡，死亡率為9.62%（23/239），造模經(jīng)各種藥物干預(yù)后存活率為90.3%（216/239）；（3）模型對照組大鼠海馬區(qū)C—fos免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞分別在2d、7d表達(dá)顯著增加，30d恢復(fù)并接近正常對照組表達(dá)水平；（4）EES中、高劑量（EESM、EESH干預(yù)組）和VPA干預(yù)后對C—fos免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞表達(dá)均有明顯下調(diào)，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），但前三者之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）； E

5、ES低劑量組（EESL干預(yù)組）表達(dá)有明顯下調(diào)趨勢，但與模型組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。 結(jié)論：（1）本實(shí)驗(yàn)采用反復(fù)多次小劑量給予Pilo和在模型鼠出現(xiàn)癲癇持續(xù)狀態(tài)（status epileticus，SE）后及時(shí)給予地西泮終止發(fā)作，可提高點(diǎn)燃成功率，同時(shí)降低模型鼠死亡率，為在LPS上進(jìn)行相關(guān)研究提供了經(jīng)濟(jì)可靠的研究載體；（2）LPS模型在急、慢性期均存在顯著的海馬神經(jīng)元結(jié)構(gòu)損傷，可見到海馬各區(qū)C—fos的表達(dá)呈雙相性改變