槲皮素抑菌作用的體內(nèi)和體外研究.pdf

1、本試驗選取240只健康、生產(chǎn)性能相近的39周齡海賽白殼蛋雞隨機分4組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)10只雞，試驗8周。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，3個試驗組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加槲皮素(quercetin)0.02％，0.04％和0.06％，選取大腸桿菌、沙門氏菌、巴氏桿菌、糞鏈球菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、綠膿桿菌、腸球菌作為體外試驗受試菌株，采用牛津杯方法進行試驗。研究槲皮素對8種禽類易感染細菌的體內(nèi)和體外抑制作用及機制，為探求槲皮素作為改善蛋雞

2、腸道內(nèi)環(huán)境和減少禽類易感染疾病發(fā)生的新型飼料添加劑提供理論依據(jù)，以便更好地指導(dǎo)生產(chǎn)實踐。本研究包括以下4部分:
　　(1)槲皮素對蛋雞盲腸腸道菌群的影響
　　與對照組相比，試驗組2和3大腸桿菌菌落總數(shù)極顯著降低(P＜0.01)。3個試驗組金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、綠膿桿菌、糞鏈球菌、腸球菌總數(shù)均顯著降低(P＜0.01、P＜0.05、P＜0.05、P＜0.01、P＜0.05);3個試驗組乳酸桿菌菌落總數(shù)有升高趨勢(P=0.07

3、2);3個試驗組雙歧桿菌菌落總數(shù)顯著提高(P＜0.05，P＜0.01，P＜0.05)。
　　(2)槲皮素對8種禽類易感染細菌的體外抑制作用
　　隨著槲皮素濃度的增加，各受試菌株的抑菌圈直徑極顯著增加(P＜0.01)。大腸桿菌、沙門氏菌、巴氏桿菌、變形桿菌、綠膿桿菌屬革蘭氏陰性菌(G-)，金黃色葡萄球菌、糞鏈球菌、腸球菌屬革蘭氏陽性菌(G+)，綜合受試菌株的最小抑菌濃度(MIC)和抑菌圈直徑的試驗結(jié)果可知，槲皮素對G-桿菌的抑

4、菌效果更好，G-桿菌對槲皮素的敏感度較高。
　　(3)槲皮素和抗生素的抑菌效果比較
　　將特異性抗生素作為陽性對照，針對槲皮素的不同濃度和抑菌圈做回歸曲線，結(jié)果表明，各受試菌株達到MIC時抑菌圈直徑所需的抗生素濃度均高于MIC，且抗生素的濃度不相同。
　　(4)槲皮素對4種禽類易感染細菌的體外抑菌機制
　　與對照組相比，槲皮素可影響受試菌株的超微結(jié)構(gòu)，使受試菌株結(jié)構(gòu)完整性和胞膜受損，細菌胞漿內(nèi)容物滲漏，最終細菌空

5、化死亡。槲皮素作用于受試菌株后，糞鏈球菌胞外滲出的堿性磷酸酶(AKP)量隨著槲皮素添加量的增加呈上升趨勢（P=0.069），其他三種受試菌株胞外滲出的AKP量極顯著增加(P＜0.01)。隨著槲皮素添加量的增加，受試菌株菌液中β-半乳糖苷酶含量、可溶性蛋白濃度、ATP酶活性（大腸桿菌除外）均極顯著增加（P＜0.01）。
　　綜上所述，適宜劑量槲皮素可以通過提高蛋雞腸道有益菌群（雙歧桿菌）菌落總數(shù)，降低有害菌群（大腸桿菌、金黃色葡萄球