NAC對糖尿病大鼠腎組織細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討抗氧化劑N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC)對糖尿病大鼠腎組織細(xì)胞凋亡的影響及其可能的機(jī)制，為臨床糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)的防治提供新的途徑。
　　方法：40只8周齡清潔級雄性SD大鼠隨機(jī)抽取10只為正常對照組(NC組)，其余一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)60 mg/kg，誘導(dǎo)1型糖尿病模型。成模的糖尿病大鼠隨機(jī)分為2組：糖尿病

2、腎病組(DN組)，NAC干預(yù)組(NAC組)，每組15只。NAC組給予NAC150 mg·kg-1·d-1灌胃，DN組及NC組給予等量生理鹽水灌胃，干預(yù)8周。8周后檢測尿微量白蛋白(MA)、血糖(BG)、血脂(BL)、糖化血紅蛋白Alc(HbAlc)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)及血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。光鏡下觀察腎臟病理學(xué)改變。采用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測大鼠腎組織細(xì)胞凋亡率。RT-PCR法檢測各組大鼠

3、腎皮質(zhì)中Caspase-3 mRNA的水平。Western-blot檢測腎皮質(zhì)中磷酸化P38MAPK(p-P38)、磷酸化絲裂原活化蛋白激酶的激酶3/6(P-MKK3/6)蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：1.與NC組比較，DN組，NAC組大鼠BG、HbA1c、BUN、Cr、MA、MDA升高(P<0.05)，SOD下降(P<0.05)；與DN組比較，NAC組大鼠MDA、BUN、Cr、MA降低(P<0.05)，SOD升高(P<0.05)，BG

4、、HbA1c降低，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；三組之間BL差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　2.腎臟病理形態(tài)學(xué)改變：NC組大鼠腎臟結(jié)構(gòu)正常，DN組大鼠腎小球體積增大，腎小球基底膜增厚，系膜基質(zhì)增多，NAC組較DN組改善。
　　3.與NC組比較，DN組和NAC組腎皮質(zhì)組織中細(xì)胞的凋亡率及Caspase-3mRNA水平增高；與DN組比較，NAC組腎皮質(zhì)組織中細(xì)胞的凋亡率及Caspase-3mRNA水平降低，差異有統(tǒng)

5、計學(xué)意義(P<0.05)。
　　4.與NC組比較，DN組和NAC組大鼠腎皮質(zhì)中p-MKK3/6、p-P38蛋白表達(dá)增高(P<0.05)，與DN組比較，NAC組大鼠腎皮質(zhì)中p-MKK3/6、p-P38蛋白表達(dá)減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：1.糖尿病大鼠體內(nèi)氧化應(yīng)激作用增強(qiáng)，從而激活腎組織P38MAPK通路，導(dǎo)致腎臟細(xì)胞凋亡增多，是糖尿病腎病發(fā)生的機(jī)制之一。2.NAC可減輕氧化應(yīng)激，改善糖尿病腎病，其機(jī)制可