皮質(zhì)骨來源成骨細(xì)胞復(fù)合異種脫蛋白骨修復(fù)兔橈骨骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本課題前期實(shí)驗(yàn)已證實(shí)皮質(zhì)骨來源的成骨細(xì)胞成分更純，表型更穩(wěn)定，且可采取連續(xù)植塊培養(yǎng)法獲取大量成骨細(xì)胞；同時(shí)體外生物相容性試驗(yàn)證實(shí)自制小牛異種脫蛋白骨(下文統(tǒng)稱異種脫蛋白骨)具有良好的生物相容性。本實(shí)驗(yàn)在前期實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以皮質(zhì)骨來源成骨細(xì)胞為種子細(xì)胞，以異種脫蛋白骨為支架材料，體外構(gòu)建組織工程骨，作為自體骨替代材料行修復(fù)兔四肢骨缺損的實(shí)驗(yàn)。本文包括以下內(nèi)容：
　　 目的：探討異種脫蛋白骨(deproteinized bone，D

2、PB)復(fù)合皮質(zhì)骨來源成骨細(xì)胞修復(fù)兔橈骨臨界骨缺損的效果。
　　 方法：48只成年雌性新西蘭大白兔的一側(cè)橈骨均建立1.5cm的臨界骨缺損模型，隨機(jī)分為A，B，C，D四組：A組植入已經(jīng)在體外共同培養(yǎng)7天的異種脫蛋白骨與成骨細(xì)胞的復(fù)合材料；B組植入自體髂骨；C組植入單純異種脫蛋白骨材料；D組作為空白對(duì)照組。術(shù)后進(jìn)行以下檢測(cè)：(1)X線觀察(術(shù)后4、8、12周)、(2)血液C反應(yīng)蛋白檢測(cè)(術(shù)后1天、3天、1周、2周)、(3)標(biāo)本大體觀察

3、(術(shù)后12周)、(4)骨密度測(cè)量(術(shù)后12周)、(5)生物力學(xué)測(cè)試(術(shù)后12周)、(6)組織形態(tài)學(xué)觀察(術(shù)后12周)。通過以上指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)各實(shí)驗(yàn)組骨缺損的修復(fù)效果。
　　 結(jié)果：
　　 (1)X線顯示：術(shù)后4周，A組有散在的密度增高影；B組自體骨吸收明顯，斷端增殖明顯；C組橈骨斷端明顯。術(shù)后8周，A組支架材料與橈骨兩斷端基本融合，支架材料所在區(qū)域密度不均；B組橈骨兩斷端基本融合，骨缺損區(qū)仍有部分沒有完全修復(fù)；C組支架材料

4、有密度增高影，橈骨斷端沒有愈合。術(shù)后12周A組植入材料已經(jīng)與橈骨兩斷端融為一體，骨折線消失并開始重塑。B組自體骨移植的髂骨與橈骨兩斷端基本融合，塑形完成。C組可見少量骨形成，材料明顯吸收，但骨折線沒有消失。D組骨缺損未修復(fù)。
　　 (2)C反應(yīng)蛋白測(cè)試顯示各實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物術(shù)后CRP均有升高，并隨時(shí)間逐漸降低，各組數(shù)據(jù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 (3)術(shù)后12周標(biāo)本大體觀察顯示：A、B組植入體與橈骨兩斷端愈合牢固；C組支架材料只

5、有部分降解，橈骨斷端界限清晰；D組骨缺損明顯，由軟組織填充。
　　 (4)術(shù)后12周骨密度測(cè)量及新骨生成均顯示A組數(shù)據(jù)低于B組，但明顯高于C組(P＜0.05)。
　　 (5)術(shù)后12周生物力學(xué)測(cè)試顯示A組的最大抗折載荷明顯高于C組(P＜0.05)，且接近于B組數(shù)據(jù)。
　　 (6)術(shù)后12周組織學(xué)觀察顯示：A組骨缺損區(qū)大量新生骨生成，B組已經(jīng)基本實(shí)現(xiàn)髓腔再通，C組僅有少量新生骨形成，DPB微孔間充滿纖維結(jié)締組織，D