沙利度胺聯(lián)合表阿霉素治療小鼠H22肝癌移植瘤的實驗研究及其機(jī)制的探討.pdf

1、目的：通過構(gòu)建小鼠H22肝癌移植瘤模型，觀察沙利度胺聯(lián)合表阿霉素對小鼠H22肝癌移植瘤生長的影響，并初步探討沙利度胺抗腫瘤的作用機(jī)制。 方法：取40只健康雄性昆明種小鼠，無菌條件下將小鼠H22肝癌腹水瘤細(xì)胞接種到小鼠右腋皮下，0.2ml/只(2.0×106個細(xì)胞)，構(gòu)建荷瘤肝癌小鼠模型。接種第二天將荷瘤小鼠隨機(jī)分為4組，每組10只：沙利度胺組(灌胃沙利度胺200mg/kg/日，連續(xù)給藥10天)、沙利度胺聯(lián)合表阿霉素組(灌胃沙利度

2、胺200mg/kg/日，連續(xù)給藥10天；腹腔注射表阿霉素50mg/m2,接種第二天給藥一次)、表阿霉素組(腹腔注射表阿霉素50mg/m2，接種第二天給藥一次)、生理鹽水對照組(灌胃生理鹽水0.3ml/日，連續(xù)給藥10天)，停藥次日脫臼處死，完整剝離瘤組織，稱重，計算抑瘤率及兩藥相互作用系數(shù)。分別提取各組瘤細(xì)胞總RNA，鑒定其完整性及含量，采用半定量RT-PCR方法檢測腫瘤組織內(nèi)bFGFmRNA、MMP-2 mRNA的表達(dá)水平，應(yīng)用免疫組

3、化方法檢測腫瘤組織內(nèi)bFGF、MMP-2蛋白的表達(dá)水平。用SPSS15.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，各組數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差的形式表示。 結(jié)果： 1、沙利度胺組瘤重為(3.67±0.44)g，抑瘤率為19.52％，沙利度胺聯(lián)合表阿霉素組瘤重為(1.95±0.24)g，抑瘤率為57.24％，表阿霉素組瘤重為(2.45±0.3 1)g，抑瘤率為46.27％，均與生理鹽水對照組相比有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。生理鹽水對照組瘤重為

4、(4.56±0.46)g。兩藥相互作用系數(shù)(CDI)=0.9889＜1，沙利度胺聯(lián)合表阿霉素組平均瘤重最低，與沙利度胺組、表阿霉素組相比均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。 2、采用半定量RT-PCR 的方法檢測各組腫瘤組織內(nèi)bFGF mRNA、MMP-2 m：RNA的表達(dá)水平。沙利度胺組bFGFmRNA表達(dá)相對值為0.3307±0.0463，沙利度胺聯(lián)合表阿霉素組bFGF mRNA表達(dá)相對值為0.3054±0.0539,均與生理鹽

5、水對照組相比有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)。生理鹽水對照組bFGFmRNA表達(dá)相對值為0.6732±0.1244，表阿霉素組bFGFmRNA表達(dá)相對值為0.6113±0.0629。生理鹽水對照組和表阿霉素組相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。沙利度胺組MMP-2mRNA表達(dá)相對值為0.2835±0.0569，沙利度胺聯(lián)合表阿霉素組MMP-2 mRNA表達(dá)相對值為0.2502±0.069,均與生理鹽水對照組相比有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。生

6、理鹽水對照組MMP-2 mRNA表達(dá)相對值為0.716±0.1126，表阿霉素組MMP-2 mRNA表達(dá)相對值為0.6847±0.1002，生理鹽水對照組和表阿霉素組相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。 3、應(yīng)用免疫組化方法檢測各組腫瘤組織內(nèi)bFGF、MMP-2蛋白的表達(dá)水平。沙利度胺組bFGF表達(dá)值為2.4±0.9661，沙利度胺聯(lián)合表阿霉素組bFGF表達(dá)值為2.3±0.675，均與生理鹽水對照組相比有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)

7、。生理鹽水對照組bFGF表達(dá)值為5.2±0.7888，表阿霉素組bFGF表達(dá)值為4.5±1.1785，表阿霉素組和生理鹽水對照組相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。沙利度胺組MMP-2表達(dá)值為2.0±0.6667.沙利度胺聯(lián)合表阿霉素組MMP-2表達(dá)值為1.9±0.7379,均與生理鹽水對照組相比有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。生理鹽水對照組MMP-2表達(dá)值為3.8±1.3166，表阿霉素組MMP-2表達(dá)值為3.2±1.0328，表阿霉素組

8、和生理鹽水對照組相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論： 1、沙利度胺具有抑制小鼠H22肝癌移植瘤增殖的作用。 2、沙利度胺可協(xié)同表阿霉素對小鼠H22肝癌移植瘤增殖的抑制作用。 3、沙利度胺可能通過下調(diào)bFGF、MMP-2的表達(dá)而發(fā)揮抑制小鼠H22肝癌移植瘤增殖作用。 4、本實驗證實了沙利度胺具有抗肝癌作用，并通過沙利度胺聯(lián)合抗腫瘤藥物表阿霉素的實驗研究豐富了肝癌的治療，為肝癌的綜合治療提供了新