飼用復(fù)合酶高產(chǎn)菌株的篩選、產(chǎn)酶及酶學(xué)性質(zhì)研究.pdf

1、通過(guò)透明圈法初篩、搖瓶液態(tài)發(fā)酵和產(chǎn)酶測(cè)定，得到產(chǎn)植酸酶菌株92株。然后通過(guò)固態(tài)發(fā)酵和產(chǎn)酶測(cè)定，篩選出一個(gè)比較優(yōu)異的飼用復(fù)合酶產(chǎn)生菌株——黑曲霉WP1。 黑曲霉WP1在以麩皮為原料的固態(tài)培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵時(shí)，能夠產(chǎn)生豐富的飼用酶系，包括植酸酶、纖維素酶、木聚糖酶、果膠酶、β-葡聚糖酶、淀粉酶和酸性蛋白酶。 黑曲霉WP1固態(tài)發(fā)酵的適宜條件為：300mL三角瓶中裝麩皮20g，水16mL，添加0.3gNaNO<,3>和0.2g S

2、DS，培養(yǎng)溫度28℃，培養(yǎng)基初始pH值6.0。在優(yōu)化培養(yǎng)條件下，黑曲霉WP1在發(fā)酵第六天各種主要飼用酶的活力分別為：植酸酶943 U/g，纖維素酶3089 U/g，木聚糖酶651U/g，淀粉酶508 U/g。 以WP1為菌種，經(jīng)過(guò)固態(tài)發(fā)酵、浸提、超濾濃縮、與賦型劑混合和干燥最終所得酶制劑的植酸酶活力為1000U/g、纖維素酶活力為2817 U/g、木聚糖酶活力為881U/g、果膠酶活力為558 U/g、β-葡聚糖酶活力為55U/

3、g、淀粉酶活力為1082 U/g、酸性蛋白酶活力為429 U/g(均非在最適條件下測(cè)得)。 黑曲霉WP1所產(chǎn)植酸酶、纖維素酶、木聚糖酶和淀粉酶的最適反應(yīng)溫度分別為55℃，70℃，50℃和70℃.植酸酶在pH值4.5和2.0有兩個(gè)酶活力高峰；纖維素酶、木聚糖酶、淀粉酶的最適宜pH值分別為4.0，3.5和5.0。植酸酶在55℃保溫1h，酶活力保持率仍然為87％；纖維素酶、木聚糖酶和淀粉酶在50"C時(shí)的熱穩(wěn)定性較好，保溫2 h后，酶活

4、力保留率分別為87％，60％和96％。植酸酶在pH2.0的條件下，40℃保溫3 h，酶活力保留率高達(dá)78.6％。纖維素酶、木聚糖酶和淀粉酶在pH3.0下保溫6h后，酶活力基本沒(méi)有變化。綜上，該菌株所產(chǎn)酶類具有良好的熱穩(wěn)定性和耐酸性，能夠適應(yīng)飼料加工和動(dòng)物胃內(nèi)環(huán)境，適于在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)用。 最后，對(duì)復(fù)合酶制劑的實(shí)際應(yīng)用性能在蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行了試驗(yàn)。在正常的營(yíng)養(yǎng)水平上，在蛋雞飼料中添加飼用復(fù)合酶制劑表現(xiàn)出良好的效果，總產(chǎn)蛋率提高了9.6