大腸桿菌及沙門氏桿菌nudB生理功能研究.pdf

1、腸道微生物，例如大腸桿菌，可以強(qiáng)酸性條件下存活數(shù)小時(shí)。在不同的生長條件、生長階段、酸性環(huán)境中，大腸桿菌會誘導(dǎo)出不同的耐酸系統(tǒng)。正是憑借精細(xì)的耐酸系統(tǒng)，大腸桿菌可以順利通過胃部的強(qiáng)酸性環(huán)境到達(dá)腸道，引起某些疾病的發(fā)生。因此更加全面深入地去研究耐酸系統(tǒng)，對于腸道疾病的預(yù)防和臨床治療是非常重要的。
　　我們在前期的研究中發(fā)現(xiàn)，大腸桿菌nudB基因敲除可以導(dǎo)致耐酸相關(guān)基因表達(dá)量的下調(diào)。以此為基礎(chǔ)，我們探究nudB基因敲除對大腸桿菌耐酸表型

2、的影響。
　　我們的研究結(jié)果顯示：1）在生長過程中有高濃度的氯霉素（50μg/mL）存在時(shí)，攜帶 pCA24N載體的野生型大腸桿菌在酸性條件下的存活能力會比不含有氯霉素時(shí)，發(fā)生輕微下降。2）一方面當(dāng)攜帶有pCA24N載體的ΔnudB基因敲除菌株在生長過程中有高濃度的氯霉素（50μg/mL）存在時(shí)，在酸性條件下的存活能力跟相同條件下生長的攜帶有pCA24N載體的野生型菌株相比發(fā)生顯著下降;另一方面當(dāng)攜帶有pCA24N載體的ΔnudB

3、ΔfolX雙基因敲除菌株在生長過程中有高濃度的氯霉素（50μg/mL）存在時(shí)，在酸性條件下的存活能力跟相同條件下生長的攜帶有pCA24N載體的野生型菌株基本相同。培養(yǎng)過程中高濃度的氯霉素（50μg/mL）和nudB基因的敲除是攜帶pCA24N載體的大腸桿菌耐酸能力顯著下降所必須具備的兩個(gè)條件，缺一不可。3）由于在攜帶有pCA24N載體的ΔnudB基因敲除菌株中超量表達(dá)gadX基因能夠?qū)⑵湓谒嵝詶l件下的存活能力恢復(fù)到相同條件下生長的野生型

4、水平，因此推測生長過程中高濃度的氯霉素和四氫單喋呤的堆積共同干擾了RpoS激活gadX基因表達(dá)的過程。對于具體的機(jī)理，我們需要進(jìn)一步地研究探索。
　　我們實(shí)驗(yàn)室前期的研究發(fā)現(xiàn)，在大腸桿菌中，nudB基因的敲除會導(dǎo)致其對甲氧芐啶和新諾明的超敏感。因此我們想知道在沙門氏桿菌中，nudB基因的敲除是不是也會影響沙門氏桿菌對兩種藥物的敏感性？我們構(gòu)建了沙門氏桿菌nudB基因敲除菌株，并且測定敲除菌株對葉酸拮抗劑類抗菌藥物的敏感性。本研究結(jié)