三葉青不定根組培快繁體系的建立與應(yīng)用研究.pdf

1、三葉青（TetrastLgma hemsLeyanum Diels et Gilg）是葡萄科崖爬藤屬多年生蔓生藤本植物，民間用來治療小兒高熱、慢性咽喉炎、抗腫瘤等，特別是在抗腫瘤方面為癌癥患者帶來了福音。
　　三葉青野生資源因過度采挖已瀕危，被列入了浙江省首批農(nóng)作物種質(zhì)資源保護(hù)名錄品種，且三葉青人工栽培技術(shù)受制，因此探索將不定根培養(yǎng)技術(shù)來生產(chǎn)其次生代謝物抗癌黃酮，不僅填補(bǔ)此方面研究的空白，而且是保護(hù)其野生資源和解決市場(chǎng)供需矛盾的有

2、效途徑。
　　本試驗(yàn)以三葉青葉片為外植體，設(shè)計(jì)了愈傷誘導(dǎo)、繼代增殖和不定根分化以及擴(kuò)繁試驗(yàn)，分析了三葉青愈傷誘導(dǎo)、增殖、不定根誘導(dǎo)的主要影響因子，初步摸索了不定根擴(kuò)繁的激素條件，旨在為今后利用三葉青不定根工業(yè)化生產(chǎn)抗癌黃酮提供技術(shù)支撐。
　　本試驗(yàn)主要結(jié)論如下:
　　(1)確定了三葉青愈傷組織的誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方為MS+30 g·L-1蔗糖+2.0 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1NAA，愈傷誘導(dǎo)率100％，愈傷

3、組織大，綠而致密。
　　(2)確定了三葉青愈傷組織繼代增殖的培養(yǎng)基配方為MS+30 g·L-1蔗糖+2.0 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1NAA，培養(yǎng)溫度為28℃，從節(jié)約成本出發(fā)，光照光源宜采用日光燈;如需提高三葉青愈傷干物質(zhì)含量，可采用紅藍(lán)混合光源，比例為9∶1或7∶3。
　　(3)確定了三葉青愈傷不定根的誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方為3/4MS/MS+1.0 mg·L-1NAA，蔗糖添加濃度為20～40 g·L-1。