低氘水對小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的研究.pdf

1、一、研究目的
　　 自然界的水中氘(Deuterium，D)的體積分數(shù)為0.015％，而低于這個體積分數(shù)的水就稱為低氘水(deuterium-depleted water,DDW)。氕和氘由于質(zhì)量不同導致氫的這兩種穩(wěn)定核素之間物理和化學性質(zhì)的不同。研究發(fā)現(xiàn)，飲用25％～30％重水可以提高腹水瘤存活期，抑制小鼠成纖維L929細胞的生長速率和引起移植瘤小鼠腫瘤組織消退。我項目組在國內(nèi)率先進行研究。實驗表明在體外情況下，低氘水對肺癌細

2、胞增殖有抑制作用，而對正常細胞無影響，推測低氘水可能是通過將腫瘤細胞阻滯在S期，并促進腫瘤細胞凋亡而在體內(nèi)外表現(xiàn)出一定的抗腫瘤特性。另外，低氘水也可以提高衰老模型小鼠心肝腦血中各種氧化指標含量，證實其具有一定抗氧化能力。本實驗是在這些研究的基礎(chǔ)上，對低氘水的免疫調(diào)節(jié)作用進行探討，進一步解釋其抗腫瘤特性，為今后輔助腫瘤治療提供實驗室資料。
　　 二、研究方法
　　 將ICR雄性小鼠(18～22g)隨機分為對照組和實驗組。兩

3、組均正常飼養(yǎng)，對照組以自來水作為飲用水，實驗組以低氘水作為飲用水。飼養(yǎng)40d后，頸椎脫臼，進行下述免疫指標的測定。
　　 (一)非特異性免疫
　　 實驗包括計算小鼠的脾臟指數(shù)，胸腺指數(shù)。
　　 (二)體液免疫
　　 實驗包括ELISA法測小鼠外周血中免疫球蛋白IgM,IgG的含量。
　　 (三)細胞免疫
　　 實驗包括MTT法測ConA刺激脾淋巴細胞增殖，遲發(fā)型變態(tài)反應(DTH)，乳酸脫氫

4、酶測NK細胞活性和流式細胞術(shù)測T細胞亞群CD4+,CD8+以及CD4+/CD8+的變化。
　　 (四)淋巴器官病理學改變及生理特征評價
　　 對兩組小鼠的脾臟及胸腺進行染色，鏡下觀察病理學改變，并依據(jù)相關(guān)評分標準對生理特征進行評價。
　　 三、研究結(jié)果
　　 (一)非特異性免疫
　　 低氘水對脾臟指數(shù)有非常顯著的提高(3.93±0.35)vs(3.45±0.28)(P＜0.01)，對胸腺指數(shù)的提高

5、沒有顯著差異性。
　　 (二)體液免疫
　　 低氘水可以顯著提高血清中IgM的含量(1.10±0.10)vs(0.97±0.05)(P＜0.01)，IgG的含量有提高但沒有統(tǒng)計學意義。
　　 (三)細胞免疫
　　 用MTT法測定ConA刺激的小鼠淋巴細胞增殖，DNFB攻擊小鼠兩耳，以及LDH法測NK細胞活性，其結(jié)果均顯示實驗組和對照組沒有顯著差異。運用流式細胞術(shù)對T細胞亞群的數(shù)值進行測量，實驗組中CD4+

6、(67.69±7.83)vs(54.04±9.19)和CD4+/CD8+(2.31±0.84)vs(1.27±0.48)的含量顯著高于對照組(P＜0.05)，而CD8+的含量則顯著低于對照(P＜0.05)。
　　 (四)淋巴器官病理學改變及生理特征評價
　　 經(jīng)過HE染色，病理讀片結(jié)果表明，受試物低氘水對小鼠脾臟和胸腺沒有影響。生理特征評價表明低氘水不會對小鼠生理特征有損害作用。
　　 四、結(jié)論
　　 低