兩種經(jīng)濟動物微衛(wèi)星標(biāo)記的跨種擴增及遺傳多樣性分析.pdf

1、世界上最大的淡水龜—大鱷龜(Macroclemys temminckii)是我國的引進種，野生資源分布于北美洲，是集食用、觀賞、藥用于一身的水產(chǎn)肉類經(jīng)濟動物。近二十年中，由于過度的捕殺，野生大鱷龜?shù)臄?shù)目逐漸下降，已被列為世界瀕危野生動物保護紅皮書名錄，其保護生物學(xué)的研究受到廣泛的關(guān)注。背瘤麗蚌(Lamprotula leai)是麗蚌屬中產(chǎn)量大、分布廣的常見種之一，其貝殼厚實，肉可以食用或做飼料，也是大型有核珍珠珠核的主要原材料，具有較高

2、的經(jīng)濟價值。我國安徽、江蘇、浙江、江西等省的大、中型湖泊及河流中均有分布，是我國特有的淡水經(jīng)濟貝類。人為的過度捕捉、環(huán)境污染等因素使得野生資源數(shù)目越來越少，分布的區(qū)域也在急劇縮小。目前背瘤麗蚌已被確定為安徽省一級保護水生野生動物和湖北省二級保護動物。
　　大鱷龜和背瘤麗蚌都是我國水產(chǎn)養(yǎng)殖的熱門品種，帶動了地區(qū)經(jīng)濟的發(fā)展。目前為止，兩個物種的種質(zhì)資源信息尚不完善，國內(nèi)對于二者的遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)研究尚未涉及。理論的研究不足與當(dāng)今的

3、養(yǎng)殖迅猛趨勢極不相稱，這極大阻礙了兩種經(jīng)濟動物養(yǎng)殖的可持續(xù)發(fā)展。為了建立種質(zhì)資源及為分子育種提供遺傳資料，更好地保護野生資源，本研究運用跨種擴增法篩選了大鱷龜和背瘤麗蚌的微衛(wèi)星標(biāo)記，同時運用本研究獲得的微衛(wèi)星引物分析了兩種經(jīng)濟動物的遺傳多樣性以及遺傳結(jié)構(gòu)。主要研究結(jié)果如下:
　　1.通過跨種擴增法成功篩選8個具有多態(tài)性的大鱷龜微衛(wèi)星位點并且對于24個個體進行了遺傳多樣性分析。共發(fā)現(xiàn)有30個等位基因，平均為3.75個;觀測雜合度(H

4、(o)）的范圍是0.042-0.955，平均為0.385;期望雜合度(HE)的范圍為0.042-0.812，平均為0.479;多態(tài)信息含量范圍為0.040-0.759，平均為0.423。經(jīng)過卡方檢驗，有4個位點顯著偏離了Hardy-Weinberg平衡(PX49、BHT32、BHT64、Cc-8)，通過Micro-checker對位點進行檢測，發(fā)現(xiàn)PX49、BHT64微衛(wèi)星標(biāo)記存在無效等位基因，這可能是造成偏離Hardy-Weinber

5、g平衡的主要原因。高密度養(yǎng)殖、樣本的數(shù)目較少也可能是造成偏離Hardy-Weinberg平衡的原因?？傮w上篩選出的8個微衛(wèi)星位點可以進一步用于大鱷龜?shù)倪z傳多樣性和群體遺傳結(jié)構(gòu)的研究。
　　2.通過跨種擴增篩選得到15對具有多態(tài)性背瘤麗蚌微衛(wèi)星位點，并對4個背瘤麗蚌地理種群:鄱陽湖(PY)、洞庭湖(DT)、洪澤湖(HZ）、安慶湖(AQ)進行了遺傳結(jié)構(gòu)分析。結(jié)果顯示:4個種群總共檢測到114個等位基因，其中數(shù)目從2到21個不等，平均等

6、位基因數(shù)為7.6;鄱陽湖擁有最高的觀測雜合度(H(o))0.455，洪澤湖具有最大的期望雜合度(HE)0.868。背瘤麗蚌4個群體在各個位點的多態(tài)信息含量和遺傳雜合度都較高，遺傳多樣性較豐富，具有較好的群體遺傳結(jié)構(gòu)。檢測發(fā)現(xiàn)所有位點不存在連鎖不平衡現(xiàn)象，表明這些微衛(wèi)星位點可以用來分析物種的遺傳信息。分子變異方差分析表明，12.56％的分化存在于種群間，44.68％的分化存在于種群內(nèi)部。兩兩種群間的Fst值在0.073和0.145之間，全