應(yīng)用siRNA敲低TPM3基因表達(dá)后對(duì)大鼠胰腺癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響.pdf

1、目的：探究TPM3在大鼠胰腺癌細(xì)胞中對(duì)其生物學(xué)行為的影響并初步闡述其可能的分子機(jī)制。
　　方法：⑴通過(guò)在大鼠胰腺中包埋DMBA的方法建立大鼠胰腺癌模型。⑵對(duì)差異蛋白TPM3進(jìn)行免疫組化驗(yàn)證。⑶通過(guò)機(jī)械分離和酶階段消化分離胰腺癌組織的方法獲取大鼠胰腺癌細(xì)胞，體外傳代培養(yǎng)獲得純度較高的細(xì)胞后，應(yīng)用siRNA敲低大鼠胰腺癌細(xì)胞中TPM3基因的表達(dá)；通過(guò)RT-PCR技術(shù)檢測(cè)其沉默效果。⑷通過(guò)Transwell實(shí)驗(yàn)和平板克隆實(shí)驗(yàn)分別對(duì)細(xì)胞的

2、侵襲、遷移能力及生長(zhǎng)增殖能力進(jìn)行觀察。
　　結(jié)果：①經(jīng)病理驗(yàn)證模型組有37.83％（14/37）形成胰腺癌，證明大鼠胰腺癌模型建立成功。②免疫組化驗(yàn)證胰腺癌組織中TPM3陽(yáng)性率明顯高于正常胰腺組織。③RT-PCR結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染TPM3-siRNA的細(xì)胞中TPM3的表達(dá)量明顯低于其余各組（P＜0.05），其余各組之間TPM3表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。④轉(zhuǎn)染TPM3-siRNA的細(xì)胞其侵襲、遷移能力及生長(zhǎng)增殖能力較對(duì)照組