基于硫化銀量子點(diǎn)的熒光-CT納米探針的制備及其靶向在體成像.pdf

1、CT成像（X-ray computed tomography）與熒光成像存在各自的優(yōu)勢與劣勢，CT成像與熒光成像結(jié)合則能同時(shí)進(jìn)行分子功能成像和組織結(jié)構(gòu)成像，實(shí)現(xiàn)兩種成像模式的優(yōu)勢互補(bǔ)。CT-熒光雙模式納米探針則是實(shí)現(xiàn)這兩種成像技術(shù)融合的前提條件。目前常用的CT-熒光探針多由貴金屬與有機(jī)熒光染料或者常見的量子點(diǎn)構(gòu)成，但是在制備與應(yīng)用過程中存在諸多問題，例如有機(jī)熒光染料激發(fā)光譜窄而發(fā)射光譜較寬、抗光漂白能力低、發(fā)光時(shí)間短、操作復(fù)雜；常用的量

2、子點(diǎn)含有有毒重金屬元素存在泄露隱患。Ag2S QDs（quantum dots）作為一種新型的近紅外量子點(diǎn)，激發(fā)譜寬而連續(xù)、發(fā)射譜可調(diào)、發(fā)射熒光峰位于第二紅外區(qū)域內(nèi)、抗光漂白、熒光壽命長、不含有毒重金屬元素，因此生物相容性高，是一種潛在的近紅外熒光分子。碘化油有較高的X射線衰減系數(shù)，它已經(jīng)被用作臨床上的X射線診斷用造影劑，有良好的生物安全性。因此，將Ag2S QDs與碘化油結(jié)合制備CT-熒光雙模式探針在雙模式成像中有廣闊的應(yīng)用前景。本文

3、完成的主要研究內(nèi)容如下：
　?。?）通過 DCC（dicyclohexylcarbodiimide）催化 DSPE-PEG2000-NH2（1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-2000]-amino）與葉酸偶聯(lián)，成功合成了DSPE-PEG2000-FA分子（1,2-dipalmitoyl-sn-glycer

4、o-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-2000]-Folate）；利用DSPE-PEG2000-FA等兩親性分子的乳化能力，成功將油溶性Ag2S QDs與碘化油包裹在一起，合成了Ag2S QDs-Iodinate Oil@DSPE-PEG2000-FA多功能納米探針。TEM（transmission electron microscopy）與DSL（dynamic

5、 light scattering）結(jié)果顯示該探針呈球形，分散性好，尺寸為139.6 nm左右。體外CT-熒光成像結(jié)果表明該納米探針的HU（hounsfield unit）值隨著濃度的增大呈線性增大，近紅外熒光信號強(qiáng)度也逐漸增強(qiáng)，該探針具有良好的體外CT造影功能和近紅外熒光成像能力。
　?。?）利用MTT法（3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,15-diphenyltetrazolium bromide）

6、和Colony-Formation Assay檢測探針的細(xì)胞毒性，結(jié)果表明當(dāng)探針濃度為25μg Ag/mL時(shí)并沒有明顯的細(xì)胞毒性。熒光、CT和TEM結(jié)果表明：該探針可以與HeLa細(xì)胞表面的葉酸受體特異性結(jié)合并被HeLa細(xì)胞吞噬，具有細(xì)胞靶向性CT-熒光雙模式成像能力，因而可以用作高表達(dá)葉酸受體的腫瘤細(xì)胞（如HeLa等）的靶向成像診斷試劑。
　?。?）體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明，該納米探針在血液中的半衰期為5.7 h，具有較長的循環(huán)時(shí)間；同時(shí)組織

7、切片結(jié)果顯示該探針對小鼠各個(gè)主要器臟的正常功能沒有明顯的影響；注射探針15天內(nèi)血細(xì)胞及肝酶活性變化表明探針對小鼠血液指標(biāo)影響很小，安全性較高；探針尾靜脈注射到異體移植HeLa腫瘤裸鼠體內(nèi)24 h后，腫瘤部位出現(xiàn)很強(qiáng)的熒光和CT增強(qiáng)信號，腫瘤組織與正常組織之間有較高的信噪比，并能清晰顯示腫瘤的結(jié)構(gòu)、大小和位置，有著優(yōu)良的在體CT造影增強(qiáng)效果和熒光成像能力，因此是一種良好的雙模態(tài)成像探針，在CT-熒光多模態(tài)靶向性成像中將具有很大的應(yīng)用前景。