井岡霉素產(chǎn)生菌的誘變選育及發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf

1、井岡霉素是一株在井岡山地區(qū)發(fā)現(xiàn)的微生物菌株所產(chǎn)生的農(nóng)用抗生素。對(duì)防治水稻紋枯病具有特效，也可用于水稻稻瘟病，小麥紋枯病的防治。此外，井岡霉素還被推廣到其他作物的病菌害防治上.雖然井岡霉素發(fā)現(xiàn)至今已有30余年，但因其高效，低毒，對(duì)環(huán)境友好，以及尚未發(fā)現(xiàn)抗藥性，深受廣大農(nóng)戶的歡迎。 本實(shí)驗(yàn)的出發(fā)菌株J1的發(fā)酵效價(jià)為20007μg/ml，為提高其效價(jià)，本研究通過(guò)紫外(UV)及硫酸二乙酯(DES)兩次誘變，獲得高產(chǎn)菌株J1-U-38-2

2、6。并對(duì)井岡霉素的發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化，使井岡霉素的效價(jià)得到了較大的提高。研究結(jié)果如下： 1 由出發(fā)菌株J1(20007μg/m1)依次進(jìn)行紫外線誘變，DES誘變。將紫外線誘變篩選出的高產(chǎn)菌株用于DES誘變處理。紫外線誘變獲得菌株J1-U-38(22695μg/ml)，DES誘變獲得菌株J1-U-38-26(25874μg/ml)，最終獲得的目標(biāo)菌株J1-U-38-26較出發(fā)菌株提高了29％。紫外線和DES的誘變貢獻(xiàn)率分別為45.

3、8％和54.2％。 2 在發(fā)酵條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)分析研究了搖瓶產(chǎn)井岡霉素的最適條件，該菌的最適發(fā)酵培養(yǎng)基為：可溶性淀粉12％、酵母粉4％、KH<,2>PO<,4>0.05％、NaCl 0.25％。最適發(fā)酵條件為：發(fā)酵起始pH值為7.2，接種量為8％，發(fā)酵溫度為37℃，發(fā)酵時(shí)間為96h。菌株最終效價(jià)達(dá)30610μg/mL，比出發(fā)菌株提高53％。 3 建立并完善了以HPLC為主的效價(jià)測(cè)定方法，以保證效價(jià)