JNK-SAPK、P38信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在高滲透壓介導(dǎo)髓核細(xì)胞凋亡中的作用.pdf

1、目的：觀察高滲透壓對兔髓核細(xì)胞活性的影響及JNK/SAPK、P38信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在此過程中的作用。
　　 方法：不同滲透壓及時間段處理髓核細(xì)胞后采用MTT實驗檢測細(xì)胞活性并運用流式細(xì)胞儀檢測髓核細(xì)胞凋亡情況,同時利用免疫熒光和Westernblot技術(shù)檢測磷酸化P38絲裂原活化蛋白激酶(Phospho-P38mitogen-activatedproteinkinases,P-P38MAPK)、磷酸化JNK/SAPK激酶(Phosp

2、ho-c-JunN-terminalkinases/Stress-activatedproteinkinases,P-JNK/SAPK)的亞細(xì)胞定位及表達(dá)水平,觀察其對髓核細(xì)胞凋亡的影響。
　　 結(jié)果：高滲透壓(600mOsm)可導(dǎo)致髓核細(xì)胞顯著凋亡及P-P38MAPK、P-JNK/SAPK蛋白表達(dá)水平改變。600mOsm各實驗組凋亡細(xì)胞均與對照組有明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01),相應(yīng)阻斷組凋亡細(xì)胞明顯減少,400mOsm各實驗

3、組和阻斷組凋亡細(xì)胞與對照組相比均無明顯差異;免疫熒光結(jié)果顯示P-P38MAPK、P-JNK/SAPK在髓核細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中均有表達(dá);經(jīng)高滲透壓(600mOsm)壓刺激后P-P38MAPK、P-JNK/SAPK表達(dá)均顯著高于對照組(P＜0.01),而相應(yīng)阻斷組P-P38MAPK、P-JNK/SAPK表達(dá)均顯著降低。
　　 結(jié)論：高滲透壓通過激活JNK/SAPK、P38信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路導(dǎo)致體外培養(yǎng)的兔髓核細(xì)胞凋亡,同時髓核細(xì)胞對輕度的滲