雌二醇對(duì)同型半胱氨酸誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞組織因子表達(dá)的影響和機(jī)制.pdf

1、目的：①研究同型半胱氨酸(Hey)對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)組織因子(TF)表達(dá)的影響以及雌二醇對(duì)其干預(yù)作用，為激素療法(HT)對(duì)血管內(nèi)皮作用提供理論依據(jù)；②探討雌二醇(E2)抑制Hey誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞TF表達(dá)的作用機(jī)制。 方法：①采用DMEM低糖完全培養(yǎng)基，培養(yǎng)HUVEC。②使用一期凝固法，檢測(cè)總細(xì)胞促凝活性。③采用逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法，檢測(cè)TF的mRNA。④利用免疫組織化學(xué)染色法，觀察核因子-κ B(N

2、F-κ B)的變化。 結(jié)果：①不同濃度的Hey(1×10-5mol/L～1×10-4mol/L)，能呈劑量依賴性地促進(jìn)HUVEC的PCA和TF mRNA增加(與對(duì)照組相比r=0.969，P<0.01)，在1×10-4mol/L達(dá)到峰值。②單獨(dú)使用E2(1×10-9mol/L～1×10-6mol/L)，對(duì)HUVEC的PCA沒(méi)有影響(P>0.05)。③E2(1×10-9moI/L～1×10-6mol/L)抑制Hey(1×10-4mo

3、l/L)誘導(dǎo)HUVEC的PCA和TF mRNA，并存在顯著量效關(guān)系(r=-0.686，P<0.01)，1×10-7mol/L是抑制的最適濃度。④雌激素完全拮抗劑氟維司群(IC1182，780)(1×10-6mol/L)對(duì)E2(1×10-7mol/L)抑制Hcv誘導(dǎo)HUVEC的PCA和TF mRNA表達(dá)沒(méi)有明顯拮抗作用(P>0.05)。⑤免疫組織化學(xué)染色觀測(cè)下發(fā)現(xiàn)，Hey可引起HUVEC的NF-K B胞漿移入核內(nèi)(P<0.01)；E2可抑

4、制Hey引起的NF-K B核易位(P<0.01)；ICI182，780對(duì)E2抑制Hey引起的NF-κ B核易位無(wú)明顯拮抗作用(P>0.05)。 結(jié)論：①Hcy誘導(dǎo)HUVEC表達(dá)TF，提示Hcy可以引起血管內(nèi)皮功能受損。②E2單獨(dú)不能刺激HUVEC表達(dá)TF，提示(1×10-9mol/L～1×10-6mol/L)E2沒(méi)有損傷正常內(nèi)皮細(xì)胞的內(nèi)皮功能③E2抑制Hcy誘導(dǎo)HUVEC表達(dá)TF，1×10-7mol/L是抑制的最適合濃度，提示E