普羅布考對(duì)兔動(dòng)脈粥樣硬化模型中斑塊穩(wěn)定性及熱休克蛋白60表達(dá)的影響.pdf

1、目的：冠心病和腦卒中是當(dāng)今嚴(yán)重危害人類健康的常見病，動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)作為心腦血管疾病的共同病理基礎(chǔ)，一個(gè)多世紀(jì)以來受到各國學(xué)者的普遍關(guān)注和高度重視。深入探討AS的發(fā)病機(jī)制、診斷方法和治療措施，已成為全球范圍的重大課題。近年來研究認(rèn)為炎癥及免疫反應(yīng)在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了十分重要的作用。熱休克蛋白60(heatshockproteinHSP60)作為自身抗原參與了自身免疫炎癥的過程，可能在動(dòng)脈粥

2、樣硬化的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用。普羅布考具有調(diào)脂、抗炎、抗氧化和抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用，但由于其可降低高密度脂蛋白膽固醇，使其在臨床應(yīng)用上受到影響。后期的研究證明，普羅布考雖然降低血高密度脂蛋白膽固醇濃度，但并不降低其轉(zhuǎn)運(yùn)膽固醇酯的作用，甚至增加其轉(zhuǎn)運(yùn)能力。有關(guān)普羅布考抗AS作用及機(jī)制的研究一直是人們關(guān)注的熱點(diǎn)。本研究通過高脂喂養(yǎng)和球囊損傷建立動(dòng)脈粥樣硬化兔模型，觀察動(dòng)脈粥樣硬化兔模型血清和髂動(dòng)脈斑塊中HSP60的表達(dá)及普羅布考對(duì)HSP6

3、0表達(dá)的影響，進(jìn)而闡明HSP60在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制及其與斑塊穩(wěn)定性的關(guān)系，并為診治動(dòng)脈粥樣硬化提供一條新的思路。 方法：將20只新西蘭大白兔按不同處理方式隨機(jī)分為3組：正常對(duì)照組(n=6)、高脂組(n=8)、普羅布考組(n=6)。對(duì)照組予以普食喂養(yǎng)。高脂組和普羅布考組高脂喂養(yǎng)(高脂飼料：1％膽固醇+5％豬油+10％蛋黃粉+84％普通飼料)，4周后高脂組和普羅布考組均于髂動(dòng)脈處行球囊內(nèi)膜剝脫術(shù)，對(duì)照組行假手術(shù)(僅分

4、離出髂動(dòng)脈不行球囊損傷)。術(shù)后高脂組和普羅布考組繼以高脂喂養(yǎng)，普羅布考組每只加用普羅布考1000mg/d口服。10周后氣栓法處死動(dòng)物，取損傷側(cè)髂動(dòng)脈組織固定，蠟塊包埋，切片，行HE染色和免疫組化染色。顯微鏡下測量動(dòng)脈斑塊面積和血管面積，計(jì)算斑塊與血管百分比，并測量斑塊中HSP60陽性表達(dá)的面積。實(shí)驗(yàn)中定期測量動(dòng)物的體重并于4周、7周、10周時(shí)抽血測量血脂，在4周和10周時(shí)抽血測量血清中的C反應(yīng)蛋白、白介素6、氧化低密度脂蛋白、丙二醛、超

5、氧化物歧化酶和熱休克蛋白60的水平。采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)掘進(jìn)行組內(nèi)和組間比較和相關(guān)分析。 結(jié)果：①實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)三組各6只家兔進(jìn)入統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)各組動(dòng)物體重較實(shí)驗(yàn)前均顯著增加(P<0.05)，但同時(shí)期各組之間動(dòng)物體重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。②在連續(xù)喂養(yǎng)高脂飼料的4周、7周和10周時(shí)高脂組和普羅布考組兔血清血脂較對(duì)照組顯著升高(P<0.05)。⑧實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)取球囊損傷處動(dòng)脈及正常對(duì)照組假手術(shù)處動(dòng)脈HE染色可見高脂組和普羅布考組

6、動(dòng)脈粥樣硬化模型建立成功，正常對(duì)照組內(nèi)膜完整光滑，未見動(dòng)脈粥樣硬化病變，且普羅布考組斑塊與血管面積比低于高脂組(P<0.05)。④血清IL-6、CRP、ox-LDL、MDA、SOD、HSP60正常對(duì)照組無明顯變化，高脂組和普羅布考組4周和10周時(shí)均高于同時(shí)期正常對(duì)照組(P<0.05)，普羅布考組4周時(shí)(用藥前)血清IL-6、CRP、ox-LDL、MDA、HSP60與高脂組無明顯差別，10周時(shí)水平低于高脂組(P<0.05)；而高脂組和普羅

7、補(bǔ)考組同時(shí)期兩組之間SOD均無差別。高脂組和普羅布考組兩者分別組內(nèi)與4周時(shí)相比，10周時(shí)血清IL-6、CRP、ox-LDL、MDA、HSP60水平明顯升高(P<0.05)；而SOD水平下降(P<0.05)。⑤正常對(duì)照組可見動(dòng)脈內(nèi)膜低水平HSP60表達(dá)，高脂組和普羅布考組內(nèi)膜及中膜均可見大量HSP60的表達(dá)，而普羅布考組內(nèi)膜和中膜HSP60的表達(dá)較高脂組明顯減少(P<0.05)。 結(jié)論： 1、普羅布考可延緩?fù)明膭?dòng)脈球囊損傷