蕎麥種質(zhì)CHS基因遺傳多樣性研究.pdf

1、苦蕎是富含黃酮的蓼科（Polygobaceae）蕎麥屬的醫(yī)食同源作物，是一種具有較好應(yīng)用前景的功能食品?？嗍w蛋白是重要的營養(yǎng)成分，苦蕎種質(zhì)中的蛋白含量對(duì)育種和產(chǎn)品質(zhì)量有很大影響。查爾酮合酶(CHS)基因是苦蕎黃酮合成途徑中的關(guān)鍵基因，其多樣性直接影響苦蕎的黃酮含量。本研究通過對(duì)苦蕎種子蛋白遺傳多樣性和苦蕎CHS基因多樣性進(jìn)行研究，為發(fā)掘利用苦蕎高黃酮基因資源、關(guān)聯(lián)分析及SNP分子標(biāo)記輔助育種奠定基礎(chǔ)。
　　采用SDS聚丙烯酰胺凝膠

2、電泳(SDS-PAGE)技術(shù)對(duì)來自14個(gè)不同地理來源的166份苦蕎材料的種子蛋白進(jìn)行遺傳多樣性分析。結(jié)果共檢測出21種遷移率不同的條帶，其中多態(tài)性條帶為14條，多態(tài)性比例為66.67％，分布于13.84～100.75 kDa之間。不同地理來源的苦蕎種質(zhì)的Shannon多樣性指數(shù)為0.4238～0.6931，總蛋白的遺傳相似系數(shù)為0.8376～0.9931，平均相似系數(shù)為0.9187。用Popgen Ver.1.32軟件根據(jù)不同地理來源苦

3、蕎資源群間遺傳相似系數(shù)可聚類成3大類，聚類結(jié)果與苦蕎地理分布相關(guān)，表明苦蕎種子蛋白遺傳多樣性與其地理來源有一定的相關(guān)性，但由于條帶較少和多態(tài)性區(qū)分較難，用SDS-PAGE技術(shù)在苦蕎種質(zhì)鑒定上有明顯的局限性。
　　采用染色體步移技術(shù)獲得四川老鴉苦蕎CHS基因的全長序列，以該序列為基礎(chǔ)，設(shè)計(jì)引物，PCR擴(kuò)增，獲得30份黃酮含量不同的苦蕎材料的CHS基因序列，對(duì)其進(jìn)行多樣性分析。結(jié)果表明:在30份苦蕎的CHS基因序列中共檢測到98個(gè)多態(tài)