特發(fā)性血小板減少性紫癜患兒Th亞群細(xì)胞因子的研究.pdf

1、目的： 特發(fā)性血小板減少性紫癜(Idiopathicthrombocytopenicpurpura，ITP)是一種自身免疫性出血性疾病，重者可危及生命。長(zhǎng)期以來(lái)認(rèn)為特發(fā)性血小板減少性紫癜的病因主要是在網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)經(jīng)抗體介導(dǎo)的血小板破壞增多，其免疫機(jī)制是患者血清中存在抗血小板抗體。近年認(rèn)為細(xì)胞免疫功能紊亂在ITP發(fā)病機(jī)制中起重要作用。輔助T細(xì)胞(Th)亞群Th1/Th2的動(dòng)態(tài)平衡涉及許多免疫應(yīng)答，一旦平衡被打破，會(huì)導(dǎo)致免疫性疾病。

2、因此我們測(cè)定ITP患兒發(fā)病時(shí)以及緩解后Th1/Th2細(xì)胞因子的水平，并與正常兒童對(duì)照，探討Th亞群相關(guān)細(xì)胞因子在兒童ITP發(fā)病機(jī)制中的作用。 方法： 實(shí)驗(yàn)共分3組：1)急性期組：34例，其中急性ITP患兒24例，慢性ITP患兒10例，由于出血癥狀嚴(yán)重或血小板嚴(yán)重低下均需治療。2)緩解期組：15例，為同期我院ITP患兒經(jīng)治療后血小板恢復(fù)正常者。3)對(duì)照組：20例，為同期我院正常體檢兒童。各組均抽取外周血血清標(biāo)本。采用Bio

3、-Plex系統(tǒng)和懸浮陣列技術(shù)通過(guò)熒光編碼檢測(cè)血清中細(xì)胞因子Th1相關(guān)細(xì)胞因子INF-γ、TNF-α、IL-2、GM-CSF和Th2相關(guān)細(xì)胞因子IL-4、IL-10的水平。 結(jié)果： 1)急性期組、緩解期組、正常兒童對(duì)照組間Th1相關(guān)細(xì)胞因子水平的比較：ITP患兒急性期組的Th1相關(guān)細(xì)胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-2、GM-CSF的水平(210.14±19.27pg/ml、30.73±3.54Pg/ml、91.32±8

4、.49pg/ml、294.20±36.23pg/ml)表達(dá)高于ITP患兒緩解期組(155.32±13.95pg/ml、19.24±2.86pg/ml、59.95±10.34pg/ml、165.96±12.30pg/ml)，均有顯著性差異(P＜0.01)；且表達(dá)高于正常兒童對(duì)照組(157.38±13.98pg/ml、18.49±2.46pg/ml、56.19±5.34pg/ml、162.98±26.90pg/ml)，均有顯著性差異(P＜0

5、.01)。緩解期組Th1相關(guān)細(xì)胞因子水平下降，與正常兒童對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P＞0.05)。 2)急性期組、緩解期組、正常兒童對(duì)照組間Th2相關(guān)細(xì)胞因子水平的比較：ITP患兒急性期組的Th2相關(guān)細(xì)胞因子IL-4、IL-10的水平(14.68±2.07pg/ml、9.57±3.66pg/ml)表達(dá)低于緩解期組(26.94±1.90pg/ml、18.66±2.63pg/ml)，均有顯著性差異(P＜0.01)；且表達(dá)低于正常兒童對(duì)照

6、組(28.63±3.58pg/ml、17.54±2.39pg/ml)，均有顯著性差異(P＜0.01)。緩解期組Th2相關(guān)細(xì)胞因子水平回升，與正常兒童對(duì)照組比無(wú)顯著差異(P＞0.05)。 3)急慢性ITP組間Th1、Th2相關(guān)細(xì)胞因子水平的比較：急性ITP組患兒的Th1相關(guān)細(xì)胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-2、GM-CSF的的表達(dá)(199.24±7.74pg/ml、29.46±3.29pg/ml、86.85±5.07pg/ml

7、、278.09±26.66Pg/ml)比慢性ITP組(236.32±11.41pg/ml、33.77±1.93pg/ml、102.07±4.15pg/ml、332.88±25.43pg/ml)低，均有顯著性差異(P＜0.01)。急性ITP組患兒的Th2相關(guān)細(xì)胞因子IL-4、IL-10的表達(dá)(15.65±1.65pg/ml、10.82±3.05pg/ml)比慢性ITP組(12.37±0.53pg/ml、6.56±3.33pg/ml)高，均

8、有顯著性差異(P＜0.01)。 4)微陣列顯著性分析(significanceAnalysisMicroarrays(sAM))結(jié)果：發(fā)現(xiàn)6種細(xì)胞因子具有顯著意義(FDR為0)。 5)應(yīng)用DNA芯片(DNA-Chip(dCHIP))軟件對(duì)Th1、Th2相關(guān)細(xì)胞因子聚類(lèi)分析結(jié)果：急性期Th1、Th2相關(guān)細(xì)胞因子具有明顯異常。疾病恢復(fù)后，細(xì)胞因子的分泌趨向正常，表現(xiàn)為緩解期和正常對(duì)照組在細(xì)胞因子聚類(lèi)的同一群集(Cluster