野生大豆干旱脅迫誘導(dǎo)基因的克隆及功能分析.pdf

1、利用吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院豐富的野生大豆種質(zhì)資源，尋找大豆耐旱相關(guān)基因，為大豆基因工程育種提供更多的上游基因材料。 本實(shí)驗(yàn)以吉林省農(nóng)科院提供的ZYD1825野生大豆為實(shí)驗(yàn)材料，運(yùn)用SSH(抑制差減雜交)的方法比較正常培養(yǎng)(Driver)和用PEG-6000模擬干旱脅迫處理14小時(Tester)的幼苗期材料轉(zhuǎn)錄水平上的差異，克隆出差異表達(dá)的cDNA片斷362條，構(gòu)建了差異表達(dá)的cDNA文庫。進(jìn)行反向Northern Blot，鑒定出5

2、2個陽性克隆，選取差異表達(dá)明顯的22個克隆測序得到19個有效的EST序列。 對本實(shí)驗(yàn)獲得的19個EST的同源性分析表明：植物耐旱性機(jī)制涉及到植物生理生化的多條途徑、受多基因控制。其中EST序列Soy9和Soy10與過氧化氫酶的編碼基因catl有很高的同源性，表明他們的增強(qiáng)表達(dá)很可能與對抗干旱狀態(tài)下過氧化氫對植物損傷增幅有關(guān)，而Soy19與基因cat3的同源性為78％，cat1、cat3如都是CAT(過氧化氫酶)的編碼基因；Soy