大葉櫟遺傳多樣性研究.pdf

1、本研究選用一種快速、簡便、可靠的分子標記——ISSR技術，探討廣西區(qū)內的大葉櫟居群的遺傳多樣性：主要研究結果如下： 1、對大葉櫟總DNA的兩種提取方法進行對比研究，發(fā)現(xiàn)，無論從外觀、產量、純度還是電泳檢查，改良CTAB法均優(yōu)于硅珠吸附法。 2、建立了適于大葉櫟ISSR擴增的反應體系：總體積20gL，DNA模板60ng、10×buffer 2.0μL，底物0.25μmol/L，引物0.3μmol/L，Taq DNA聚合酶1

2、 U。擴增反應的程序：預變性，94℃5min；變性，94℃45s；退火，51.2℃～54℃45s；延伸，72℃1.5min,45個循環(huán)；完全延伸，72℃7 min：4℃保存。 3、從100條ISSR引物中篩選出11條帶清晰、多態(tài)性豐富的引物用于大葉櫟DNA模板的擴增，它們分別是810、811、834、836、840、841、842、843、844、857和864。 4、采用ISSR分子標記對六堡、高基、靈川、古譚、田東和

3、垌中六個居群(每個居群30個樣本)的大葉櫟進行了遺傳多樣性和遺傳結構研究。11條引物擴增得到151個清晰的條帶，其中多態(tài)帶132個，多態(tài)帶百分率(PPB)為78.12％。POP Gene(Version 1.31)軟件分析結果表明，高基居群的遺傳多樣性水平最高(PPB=68.87，He=0.2216，I=0.3333)，居群的遺傳結構分析表明，總的遺傳變異有81.54％存在于居群內，而居群間的遺傳變異占總變異的18.46％。UPGMA聚