南瓜未受精胚珠離體培養(yǎng)影響因子研究.pdf

1、南瓜雙單倍體育種技術(shù)能有效提高南瓜育種效率，南瓜未受精胚珠培養(yǎng)方法是該項(xiàng)技術(shù)的主要內(nèi)容之一。為探討影響南瓜未受精胚珠誘導(dǎo)因子的最佳狀態(tài)，試驗(yàn)中對(duì)“貝栗灰”品種的取樣時(shí)期、子房切片厚度、黑暗熱激方式、外植體滅菌方式、胚珠培養(yǎng)條件、激素濃度及配比、礦質(zhì)元素濃度及種類(lèi)等影響因子進(jìn)行了研究。研究的主要結(jié)果如下:
　　1.影響南瓜未受精胚珠生長(zhǎng)因子的最佳狀態(tài)篩選:(1)南瓜未受精子房開(kāi)花前一天胚珠膨大轉(zhuǎn)綠率為85％，愈傷誘導(dǎo)率為32.5％。

2、開(kāi)花當(dāng)天膨大轉(zhuǎn)綠率為100％，愈傷誘導(dǎo)率為57.5％，因此取樣時(shí)期為當(dāng)天開(kāi)放的材料效果較好。(2)南瓜未受精胚珠子房切片的最適厚度為1.0mm。(3)利用有效氯含量為7％的NaClO溶液消毒6min，南瓜子房片上胚珠膨大轉(zhuǎn)綠數(shù)量最多，可達(dá)100％，無(wú)污染現(xiàn)象。(4)在38℃的溫度下，黑暗熱激5d，南瓜未受精胚珠均膨大轉(zhuǎn)綠。(5)在室溫為30℃，光照強(qiáng)度為2000lx，光照時(shí)間為14h/10h的環(huán)境下，南瓜未受精胚珠轉(zhuǎn)綠效果最好，可達(dá)85

3、％，膨大率為92.5％。
　　2.南瓜未受精胚珠膨大轉(zhuǎn)綠培養(yǎng)基的篩選:在MS培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加1mg/L2，4-D+0.5mg/L NAA+1mg/L6-BA（d1培養(yǎng)基）誘導(dǎo)胚珠轉(zhuǎn)綠，轉(zhuǎn)綠率為60％，膨大率達(dá)85％。
　　3.在Z培養(yǎng)基(d1培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加30mg/LAgNO3)基礎(chǔ)上添加礦質(zhì)元素CaCl2及ZnSO4·7H2O有助于胚珠形成愈傷組織，其CaCl2添加量為40mg/L時(shí)，愈傷誘導(dǎo)率可達(dá)到100％，轉(zhuǎn)綠率也