載銀珊瑚羥基磷灰石人工骨生物學(xué)性能研究.pdf

1、研究目的：骨缺損治療為臨床一大難題，由于骨組織結(jié)構(gòu)及其功能特異性，雖然治療方法頗多，但均有一定程度上的缺陷。而開放性骨折、慢性骨髓炎等造成的四肢、頜面骨缺損均為污染性、感染性傷口，常規(guī)植骨材料修復(fù)更易因繼發(fā)感染而導(dǎo)致植骨失敗。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑谟趯ふ姨娲泽w骨移植的具有骨傳導(dǎo)、骨誘導(dǎo)并能治療原發(fā)病灶雙重作用的人工骨材料。在原CHA研究基礎(chǔ)上利用物理化學(xué)方法合成Ag-CHA,并對(duì)該材料進(jìn)行物理性質(zhì)、生物學(xué)作用進(jìn)行評(píng)估、分析。 研究方法：

2、 1.Ag-CHA的研制與物性鑒定： 通過物理和化學(xué)方法合成Ag-CHA;應(yīng)用掃描電鏡、能譜分析儀X-射線能譜聯(lián)用儀，對(duì)Ag-CHA進(jìn)行物性鑒定。 2.Ag-CHA的抗菌性能實(shí)驗(yàn)： CHA、0.1molAg-CHA、0.01molAg-CHA、0.001molAg-CHA各6塊，大小均為1cm×1cm×1cm，分別置于接種有臨床株金黃色葡萄球菌(ATCC1811)、大腸桿菌(ATCC1818)、綠膿假單胞

3、菌(ATCC1823)瓊脂固體培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)72h，測量抑菌圈。 3.Ag-CHA細(xì)胞相容性實(shí)驗(yàn) CHA、0.01molAgCCHA各3塊，大小均為1cm×1cm×1cm，分別制備CHA、100％Ag-CHA浸提掖、50％Ag-CHA浸提掖、10％Ag-CHA培養(yǎng)基浸提掖。觀察不同濃度浸提掖對(duì)3T3小鼠成纖維細(xì)胞形態(tài)、活性影響。 4.Ag-CHA溶血試驗(yàn) CHA、0.01molAg-CHA各6塊，大

4、小均為1cm×1cm×1cm，分別制備CHA、Ag-CHA生理鹽水浸提掖10ml。取新鮮人血(3日內(nèi)，每400ml全血中含有復(fù)方枸櫞酸鈉56m1)10毫升加入10ml生理鹽水稀釋。 試驗(yàn)分為四組：生理鹽水組(陰性對(duì)照組)、蒸餾水組(陽性對(duì)照組)、CHA組、Ag-CHA組。將各管與37℃水浴加熱60min，加入預(yù)熱人血細(xì)胞懸液0.2ml。測定各管OD值(吸收波長545nm)。 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析： 實(shí)驗(yàn)中數(shù)據(jù)均為Mean±

5、s。數(shù)據(jù)處理均采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)分析軟件。組間比較均采用單向方差分析(OneWayANOVA)，兩兩比較采用LSD法。顯著性差異水平為0.05。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 1.掃描電鏡觀察：Ag-CHA表面附著有Ag離子。且Ag-CHA依然呈孔隙樣結(jié)構(gòu)，Ag+附著于CHA腔隙表面。浸潤與不同濃度硝酸銀溶液中的CHA孔隙及其表面所吸附的Ag+量不同。0.001MmAg-CHA組空隙及表面Ag+吸附稀疏，而0.1mMAg-CHA空隙

6、及表面Ag+吸附致密。 2.Ag-CHA主要元素為O、Ca、P、Ag。Ag-CHA中Ag所占比例與濃度相關(guān)，且不同濃度組間Ag-CHACa、Ag組成比存在顯著差異(F=1919.900，P=0.001).。 3.Ag-CHA體外抗感染實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與CHA對(duì)照組相比較，其金黃色葡萄球菌(臨床株)、綠膿桿菌(臨床株)、大腸桿菌(臨床株)培養(yǎng)皿抑菌圈差異顯著(F=422.952，289.693，3461.754，P均小于0.

7、001)。 4.Ag-CHA細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，不同濃度銀離子所得到的Ag-CHA與對(duì)照組間OD值、相對(duì)增長率(relativegrowthrate，RGR)差異顯著(F=0.672，0.446，P=0.626，0.776)。Ag-CHA，CHA釋放入組織液中的少量Ag離子對(duì)3T3小鼠成纖維細(xì)胞的生長、增值沒有影響。 5.不同濃度的Ag-CHA人血溶血率為3.52％、CHA人血溶血率為2.25％，均＜5％，屬于臨床可應(yīng)