應(yīng)用宮頸液基細(xì)胞檢測(cè)CIN與HPV16、18E6感染的關(guān)系及臨床意義.pdf

1、目的： 子宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasis CIN)，包括宮頸非典型增生(cervical dysplasia)及子宮頸原位癌(carcinoma in situ，CIS)。近年研究發(fā)現(xiàn)人乳頭狀瘤病毒(human papillomaviruses，HPV)感染與CIN和子宮頸癌的發(fā)生有密切關(guān)系。在已發(fā)現(xiàn)的高危型HPV基因型中，HPV16、18致病作用最強(qiáng)，主要導(dǎo)致CINⅡ、Ⅲ級(jí)

2、病變和宮頸癌的發(fā)生。資料表明，HPV16、18E6蛋白具有細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能。本研究應(yīng)用液基細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)(liquid -based cyology test，LCT)對(duì)2004年11月-2005年8月中國醫(yī)科大學(xué)附屬一院婦科門診6251例就診患者進(jìn)行了宮頸病變的調(diào)查，同時(shí)采用免疫印記法(Westem blot)在國內(nèi)首次利用宮頸液基細(xì)胞，對(duì)86例CIN及14例慢性宮頸炎患者進(jìn)行HPV16、18 E6蛋白的檢測(cè)，以探討HPV在該人群中的感染情況

3、，CIN與HPV16、18 E6感染的關(guān)系及聯(lián)合應(yīng)用LCT檢查和HPV16、18E6蛋白檢測(cè)對(duì)CIN病人進(jìn)行篩查的臨床意義。 材料和方法： 1、材料 調(diào)查來自2004年11月-2005年8月中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦科門診作宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查的患者6251例，年齡21-76歲，平均45.53歲。無宮頸手術(shù)史、目前未孕、無盆腔放射治療史。 用于Western blot分析的病例系由LCT檢查中篩選，分組以組

4、織病理診斷結(jié)果為依據(jù)。包括宮頸慢性炎癥(對(duì)照組)14例、CIN Ⅰ(CIN Ⅰ組)24例、CINⅡ(CINⅡ組)30例、CINⅢ(CINⅢ組)32例，以上100例中包含了ILT檢查陰性的34例病人，年齡23～57歲，平均年齡41.23歲。 兔抗人HPV16、18E6抗體和羊抗兔IgG-HRP，購于美國Santa公司。 2、方法: 對(duì)2004年11月-2005年8月中國醫(yī)科大學(xué)附屬一院婦科門診作宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查(liqu

5、id-based cyology test，LCT)的6251例患者進(jìn)行HPV感染、宮頸病變調(diào)查，并對(duì)其中100例(86例CIN及14例慢性宮頸炎)采用免疫印記法(Western blot)檢測(cè)其宮頸液基細(xì)胞殘液中HPV16、18 E6的表達(dá)。 3、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法將所得結(jié)果采用兩樣本X<'2>比較檢驗(yàn)。P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 在6251例行LCT檢查的患者中，檢出LSIL及以上病例954例(15.3％

6、)；檢出HPV感染301例(4.8％)，主要分布在LSIL病變中，而且隨著宮頸病變的加重，挖空細(xì)胞的陽性檢出率明顯下降。對(duì)403例LCT檢查陽性或陰性但臨床高度可疑者(如：重度糜爛、接觸出血等)進(jìn)行了陰道鏡下活組織檢查，結(jié)果顯示LCT檢查與活檢病理的符合率隨著宮頸病變的加重顯著上升，其中LSIL52.8％(74/140)、HSIL88.9％(120/135)、CC100％(56/56)。但在72例ASCUS中有24例經(jīng)病理證實(shí)為CIN

7、Ⅰ(20例)、CINⅡ(2例)和CINⅢ(2例)；140例LSIL中有13例經(jīng)病理證實(shí)為CINⅡ(11例)和CINⅢ(2例，其中包括一例原位癌)。 Western blot法檢測(cè)宮頸液基細(xì)胞殘液HPV16、18E6陽性表達(dá)結(jié)果顯示，隨CIN病變的加重HPVl6、18E6感染率上升，分別為CIN Ⅰ 33.3％(8/24)、CINⅡ46.7％(14/30)、CINⅢ59.3％(19/32)，與對(duì)照組7.1％(1/14)相比，后兩組

8、有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05、P<0.01)，而前者差異不顯著(P>0.05)。其中有2例LCT檢查陰性的CINⅢ和8例CINⅡ經(jīng)Western blot檢測(cè)HPV16、18E6蛋白表達(dá)陽性，而這些病例在LCT中并未見到挖空細(xì)胞出現(xiàn)。 CIN與宮頸細(xì)胞HPV16、18E6感染密切相關(guān)，利用宮頸液基細(xì)胞聯(lián)合進(jìn)行LCT和HPV16、18E6蛋白免疫印記檢測(cè)可提高CIN病人的篩出率，且一次取材，方便靈敏，對(duì)臨床及時(shí)發(fā)現(xiàn)高危CIN病例，并