CTLA4-Ig基因轉(zhuǎn)移抑制角膜移植術(shù)后免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、青島大學(xué)博士學(xué)位論文CTLA4Ig基因轉(zhuǎn)移抑制角膜移植術(shù)后免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究姓名：李紹偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：謝立信2003.3.25原，因此，在用藥途徑上，不應(yīng)該只針對(duì)角膜內(nèi)皮細(xì)胞，而應(yīng)該重視供受體的角膜基質(zhì)和上皮。本研究利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將CTLA4一Ig基因分別轉(zhuǎn)染高危角膜移植動(dòng)物模型兔供體眼角膜基質(zhì)或內(nèi)皮細(xì)胞中，或兔受體眼前房中，然后觀察何種途徑是抑制穿透性角膜移植術(shù)后免疫排斥反應(yīng)的主要途徑，并對(duì)CTLA4一

2、Ig局部轉(zhuǎn)基因在抑制高危角膜移植免疫排斥反應(yīng)中的作用作出評(píng)價(jià)。材料和方法一、攜帶目的基因的病毒載體所有用于本實(shí)驗(yàn)的重組腺病毒載體都是來(lái)自El區(qū)缺失的5型人腺病毒(～)攜帶報(bào)告基因的病毒載體1Ad—LacZ：攜帶LacZ基因的腺病毒載體。由美國(guó)賓西法尼亞大學(xué)醫(yī)學(xué)院基因治療實(shí)驗(yàn)室陳有海教授惠贈(zèng)。2Ad—GFP：攜帶編碼綠熒光蛋白(greenfluorescenceprotein，GFP)基因的腺病毒載體。由美國(guó)賓西法尼亞大學(xué)醫(yī)學(xué)院基因治療實(shí)

3、驗(yàn)室梁風(fēng)歧教授惠贈(zèng)。(二)攜帶治療基因的病毒載體1AdCTLA4Ig(human)：攜帶編碼人細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞抗原4(cytotoxicTLymphocyteantigenCTLA4)細(xì)胞外部分和人IgGFc的復(fù)制缺陷腺病毒，目的基因CTLA4一Ig由CMV啟動(dòng)子控制，分泌的CTLA4Ig是可溶性的。由臺(tái)灣長(zhǎng)庚大學(xué)醫(yī)學(xué)院，長(zhǎng)庚紀(jì)念醫(yī)院內(nèi)分泌科BrendRay—SeaHsu教授惠增。2Ad—CTLA4一[g(mice)：攜帶編碼鼠CTLA