無致病力hrp-突變體防治番茄青枯病作用研究.pdf

1、由Ralstoniasolanacearum引起的青枯病是發(fā)生于熱帶、亞熱帶及溫帶的一種毀滅性土傳病害。青枯病菌的寄主范圍很廣，可以危害35個(gè)科的200多種植物，我國(guó)絕大部分省區(qū)都有該病的發(fā)生和危害。隨著新寄主的不斷出現(xiàn)和近年來全球變暖等因素，世界范圍內(nèi)青枯病的發(fā)生也越來越普遍和嚴(yán)重，探究青枯病致病和植物抗病機(jī)理以及尋找防治青枯病的有效方法顯得尤為重要。 生物防治的研究和應(yīng)用是當(dāng)前青枯病防治的研究熱點(diǎn)之一。過去沿用的生物防治措施

2、的原理是通過拮抗微生物分泌的抗生素或水解酶來殺死病原物，或通過營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)影響病原物的繁殖和生長(zhǎng)。近年來，國(guó)內(nèi)外學(xué)者在利用基因工程手段獲得的青枯病菌無致病力菌株防治植物青枯病方面取得了初步進(jìn)展。研究發(fā)現(xiàn)，利用青枯病菌hrp(hypersensitivereactionandpathogenicity)基因簇中的某些片斷缺失的方法產(chǎn)生的無致病力突變體，在室內(nèi)防治番茄青枯病取得了很好的效果，但相關(guān)的機(jī)理還不清楚。本研究以hrp-突變體為生防因子

3、，建立以我國(guó)番茄品種為材料的青枯病生防體系，測(cè)定其生防效果，并對(duì)機(jī)理進(jìn)行了初步研究。 首先分別采用傳統(tǒng)蘸根接種法和改良蘸根接種法，對(duì)供試番茄品種接種青枯病致病菌株GMI1000。發(fā)現(xiàn)感抗程度不同的番茄品種對(duì)GMI1000菌株的反應(yīng)在兩種接種方法中表現(xiàn)一致，但由于改良蘸根接種法存在著節(jié)省人力、物力和試驗(yàn)空間以及縮短接種周期等特點(diǎn)，成為本論文采用的接種方法，同時(shí)也為大量番茄青枯病苗期抗病性鑒定提供了一種迅速而有效的接種方法。以中蔬6

4、號(hào)為供試番茄品種，預(yù)接種hrp-突變體后不同時(shí)間點(diǎn)再接種致病菌GMI1000，發(fā)現(xiàn)預(yù)接種hrp-突變體后6h-48h具有良好的生防效果，而72h和7d的生防效果雖然大大降低，但仍有一定的生防作用。 預(yù)接種hrp-突變體的生防效果體現(xiàn)在致病菌在番茄體內(nèi)的繁殖能力降低。單接致病菌GMI1000的番茄植株，接種后第2天體內(nèi)就出現(xiàn)了細(xì)菌，而且在番茄植株內(nèi)繁殖很快，第8天達(dá)到最高值，細(xì)菌濃度為1015cfu/g；而預(yù)接種hrp-突變體的番

5、茄植株，接種后第8天才出現(xiàn)致病菌，第10天的細(xì)菌濃度為106cfu/g。 對(duì)接種的番茄進(jìn)行莖基部組織超顯微觀察，接種GMI1000致病菌24h及番茄發(fā)病中早期，番茄木質(zhì)部導(dǎo)管內(nèi)都發(fā)現(xiàn)了大量細(xì)菌，導(dǎo)管鄰近薄壁細(xì)胞細(xì)胞壁發(fā)生降解；而同時(shí)期接種hrp-突變體的番茄木質(zhì)部導(dǎo)管內(nèi)卻沒有細(xì)菌，細(xì)胞壁正常。本研究中沒有觀察到由hrp-突變體引起的植物抗病結(jié)構(gòu)的變化，如侵填體等?？赡苡捎谒≈仓瓴课徊贿m所致，也可能由于植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)抗性不是hrp