格林—巴利綜合征患者血清IL-22及IL-37水平的變化及其臨床意義.pdf

1、研究目的與背景：
　　格林—巴利綜合征(Guillain—Barre Syndrome，GBS)是一種常見的多發(fā)性脊神經(jīng)和周圍神經(jīng)的脫髓鞘疾病，由體液免疫及細(xì)胞免疫共同介導(dǎo)，又稱為對稱性多神經(jīng)根炎或急性特發(fā)性多神經(jīng)炎。臨床上表現(xiàn)為進行性上升性對稱性麻痹、四肢軟癱，以及不同程度的感覺障礙。細(xì)胞因子在自身免疫損傷中起到啟動、維持和調(diào)節(jié)的作用，細(xì)胞因子在GBS及其動物模型ENA中的作用受到越來越多的學(xué)者關(guān)注，經(jīng)大量實驗研究表明，免疫性疾

2、病的發(fā)展與轉(zhuǎn)歸是由促炎性細(xì)胞因子及抑炎性細(xì)胞因子介導(dǎo)的Th1/Th2型細(xì)胞間平衡的改變造成的。白細(xì)胞介素-22(Interleukin-22，IL-22)是最近發(fā)現(xiàn)的IL-10細(xì)胞因子家族中的成員之一，NK細(xì)胞、γδT細(xì)胞、LTi細(xì)胞、Th17細(xì)胞、Th22細(xì)胞均可產(chǎn)生IL-22，其中Th17細(xì)胞是一種CD4+T效應(yīng)細(xì)胞，可分泌多種細(xì)胞因子，如IL-2、IL-17A、IL-17F、IL-22，在實驗性自身免疫性腦炎的小鼠模型(EAE)中

3、，IL-17mRNA基因水平和蛋白質(zhì)水平均升高，IL-22及IL-17在多種體外試驗及動物模型中被證實可相互協(xié)同，共同參與促炎性免疫反應(yīng)，同時，在腫瘤細(xì)胞中，IL-22可誘導(dǎo)結(jié)合珠蛋白、血清淀粉樣蛋白、α1抗胰凝乳蛋白酶等急性反應(yīng)期蛋白的產(chǎn)生。白介素-37(Interleukin-37，IL-37)是IL-1細(xì)胞因子家族中的成員之一，IL37在巨噬細(xì)胞或上皮細(xì)胞內(nèi)表達，可以抑制TLR誘導(dǎo)的促炎因子IL-1α、IL-1β、IL-18、IF

4、N-γ和TNF-α的產(chǎn)生、釋放以及促進樹突狀細(xì)胞的活性，也可以促進CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的表達，從而有效的抑制免疫應(yīng)答。此次研究通過檢測GBS患者急性期及恢復(fù)期血清中IL-22及IL-37的濃度，探討這兩種細(xì)胞因子在GBS發(fā)病及轉(zhuǎn)歸的過程中可能起到的作用，為新的GBS治療方案提供進一步的理論基礎(chǔ)。
　　資料和方法：
　　收集2012年9月至2014年2月間在鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的GBS患者共51例，其中男

5、性患者30例，女性患者21例，年齡8～74歲，平均(42.00±18.23)歲。所有入選的GBS患者均經(jīng)過我院神經(jīng)內(nèi)科兩名以上醫(yī)師詳細(xì)詢問病史、神經(jīng)系統(tǒng)?？企w檢、肌電圖檢查及腦脊液檢測，檢查結(jié)果符合Asbury等于1990年制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)，然后對所有入選患者進行Hughes評分來評測疾病的嚴(yán)重程度。選取同一時期在我院門診體檢的健康志愿(HealthyControl，HC)者31例為對照組，其中男性19例，女性12例，年齡8～66歲，平均

6、(40.61±18.23)歲。抽血前無手術(shù)史、免疫治療史，無感染性疾病、腫瘤、心腦血管疾病等。實驗組和對照組年齡及性別差別無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　在采血前，每位健康人及患者需禁食、禁水10小時以上。在第二日清晨抽取肘靜脈血3ml，隨后置于真空采血管中（無抗凝劑），放入-80℃冰箱備用。GBS患者組均于急性期（起病1～14天）和恢復(fù)期（起病30～60天）分別采集肘靜脈血標(biāo)本。健康對照組僅采集一次靜脈血標(biāo)本。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附方法

7、(Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA)測定血清中IL-22和IL-37的水平。采用SPSS17.0軟件包處理所有數(shù)據(jù)，應(yīng)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示定量資料。運用兩獨立樣本t檢驗進行兩組定量資料的比較，運用Spearman相關(guān)系數(shù)分析兩組定量資料的相關(guān)性，運用單因素方差分析進行多組定量資料的比較，隨后采用組間比較(LSD檢驗)法，若P＜0.05，表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：

8、r>　　1.GBS患者組急性期、恢復(fù)期與對照組血清IL-22水平的比較:GBS患者組急性期血清IL-22水平(110.70±24.37)ng/L較恢復(fù)期(78.32±11.68)ng/L顯著升高，P=0.001;較對照組(75.62±15.00)ng/L顯著升高，P=0.000;GBS患者組恢復(fù)期血清IL-22水平雖有所下降，但仍較對照組升高，P=0.030。
　　2.GBS患者組恢復(fù)期、急性期與對照組血清IL-37水平的比較:G

9、BS患者組恢復(fù)期血清IL-37水平(84.38±6.67)ng/L較急性期(62.80±9.29)ng/L顯著升高，P=0.004;較對照組(57.82±16.11)ng/L顯著升高，P=0.000;GBS患者組急性期血清IL-37水平雖較恢復(fù)期降低，但仍較對照組升高，P=0.039。
　　3.GBS患者急性期血清IL-22及IL-37水平與疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系:GBS患者急性期血清中IL-22水平與Hughes評分顯著相關(guān)，r=0

10、.803，P=0.001;GBS患者急性期血清中IL-37水平與Hughes評分無明顯相關(guān)性，r=-0.246，P=0.082。
　　4.GBS患者恢復(fù)期血清IL-22及IL-37水平與疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系:GBS患者恢復(fù)期血清中IL-22水平與Hughes評分無明顯相關(guān)性，r=0.029，P=0.839;GBS患者恢復(fù)期血清中IL-37水平與Hughes評分顯著相關(guān)，r=-0.766，P=0.000。
　　5.各類型GBS患

11、者急性期血清IL-22及IL-37水平的比較:脫髓鞘+軸索型GBS患者急性期血清IL-22水平(141.13±23.45)ng/L較軸索型(108.41±9.25)ng/L升高，P=0.002，較脫髓鞘型(90.45±3.62)ng/L顯著升高，P=0.000，軸索型GBS患者急性期血清IL-22水平較脫髓鞘型升高，P=0.004;脫髓鞘+軸索型、軸索型、脫髓鞘型患者急性期血清中IL-37水平的差異無統(tǒng)計學(xué)意義，F(xiàn)=3.098P=0.0

12、54。
　　6.各類型GBS患者恢復(fù)期血清IL-22及IL-37水平的比較:脫髓鞘+軸索型、軸索型、脫髓鞘型患者恢復(fù)期血清中IL-22水平的差異無統(tǒng)計學(xué)意義，F(xiàn)=0.473P=0.626;脫髓鞘型GBS患者恢復(fù)期血清IL-37水平(90.10±3.72)ng/L，較軸索型(84.44±3.06)ng/L升高，P=0.010，較脫髓鞘+軸索型(75.52±3.30)ng/L顯著升高，P=0.000軸索型GBS患者恢復(fù)期血清IL-37

13、水平，較脫髓鞘+軸索型升高，P=0.005。
　　結(jié)論：
　　1.IL-22在GBS患者急性期與恢復(fù)期血清中的表達水平均較對照組顯著升高，推測IL-22可能參與GBS免疫應(yīng)答。GBS患者急性期IL-22水平較恢復(fù)期升高更顯著，考慮IL-22可能主要在免疫應(yīng)答起始階段起促炎作用。
　　2.IL-37在GBS患者急性期與恢復(fù)期血清中的表達水平均較對照組顯著升高，考慮IL-37可能參與GBS免疫應(yīng)答。GBS患者恢復(fù)期IL-3

14、7水平較急性期升高更顯著，考慮IL-37可能主要在疾病恢復(fù)期起抑炎性作用。
　　3.IL-22在GBS患者急性期血清中的表達水平與疾病嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，IL-22水平越高，病情越重;IL-37在GBS患者恢復(fù)期血清中的表達水平與疾病嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)，IL-37水平越高，病情越輕。
　　4.GBS患者急性期IL-22升高可能參與髓鞘脫失及軸索的損害，其顯著升高可能提示預(yù)后不良，GBS患者恢復(fù)期IL-37升高可能參與髓鞘及軸索的