Landau-Kleffner綜合征的預(yù)后特征及全基因組拷貝數(shù)變異的驗證研究.pdf

1、第一部分:40例LKS患兒臨床表型及預(yù)后研究
　　目的:①回顧性分析LKS的臨床特征并進行激素治療的前瞻性預(yù)后分析;②探討難治性LKS的臨床特點，對生酮飲食治療難治性LKS的療效進行分析。
　　方法:2008年2月至2013年2月復旦大學附屬兒科醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科診斷的40例LKS病例，1.回顧性分析40例LKS患兒的臨床表型，包括:失語特征、癲癇表型、認知狀況和腦電圖特征;2.激素治療方法:甲基強的松龍15-20mg/kg.d靜

2、脈滴注，連用3天，暫停4天，重復3個療程，然后改為強的松口服2mg/kg.d×1月→1.5 mg/kg.d×1月→1 mg/kg.d×1月→0.5 mg/kg.d×1月→0.25mg/kg.d×1月→停用（療程5-6月）;3.自定療效評估方法，包括失語療效評估（患兒家長記錄患兒失語起效時間、顯效時間、完全恢復正常時間或不再進步時間）;LKS綜合療效評估（即不同療程LKS患兒的失語是否恢復正常、癲癇發(fā)作是否控制和/或ESES是否持續(xù)存在、

3、智力是否正常3項進行Ⅰ級（完全恢復）～Ⅳ級（無效）綜合評分;4.分析難治性LKS病例臨床特征并給予生酮飲食治療（經(jīng)典約翰霍普金斯方案），觀察療效。
　　結(jié)果:1.一般資料:①40例患兒，男性20例，女性20例;就診年齡29個月～192個月（中位數(shù)62個月）;②失語發(fā)生年齡15個月～168個月（中位數(shù)50個月）;③確診病程10天～7年（中位數(shù)6個月）;2.臨床特征:(1)失語特征:①失語性質(zhì):40例患兒均存在聽覺性失認及表達障礙，其

4、中表達障礙為主8例(20.0％)，聽覺性失認為主32例(80.0％);②失語程度:完全性失語21例(52.5％)，部分性失語19例(47.5％);(2)癲癇特征:①癲癇發(fā)作27例(67.5％)，其中18例(66.7％)發(fā)生在失語之前，9例(33.3％)發(fā)生在失語之后;②癲癇發(fā)作類型:單一表型16例(59.3％)，多種表型11例(40.7％);(3)認知評估:DST評估MI異常37例(92.5％)，正常范圍3例(7.5％);(4)腦電特征

5、:①背景活動:正常28例(70.0％)，輕度減慢12例(30.0％);②異常放電:發(fā)作性異常32例(80.0％);腦電圖無異常放電8例(20.0％);③ESES現(xiàn)象:10例(25.0％);3.預(yù)后分析:(1)31例患兒采用激素治療，①失語療效評估顯示各種療效出現(xiàn)的中位數(shù)分別為:開始進步(T1)3周（30例），明顯進步(T2)3個月（23例），恢復正常(T3)9個月（18例），不再進步(T4)10個月（8例）;②綜合預(yù)后評估:1）多數(shù)病例

6、激素治療有效（隨著隨訪時間的延長，Ⅰ級預(yù)后病例數(shù)逐漸增加，Ⅳ級預(yù)后的病例數(shù)為零）;2）Ⅰ級預(yù)后（即完全恢復）的患兒接近50％;3）18個月可作為療效結(jié)局的參考評估時間;(2)6例難治性LKS患兒（a.難治性癲癇，b.激素治療失語無效，c.智力低下）采用生酮飲食治療，3例因故退出，3例接受治療并隨訪，1例預(yù)后評分Ⅱ級（療程15個月），2例預(yù)后評分Ⅳ級（療程6～7個月）。
　　結(jié)論:①LKS的臨床表型復雜，容易誤診;②激素治療后多數(shù)L

7、KS患兒失語及認知改善，預(yù)后不佳的難治性LKS的特征有待進一步識別;③本研究嘗試的LKS綜合預(yù)后評估方法可以較全面的反映LKS患兒的預(yù)后狀況;④生酮飲食可作為部分難治性LKS的治療選擇。
　　第二部分:20例LKS患兒全基因組拷貝數(shù)變異的驗證研究
　　目的:LKS病因及發(fā)病機制不明，推測其與遺傳有關(guān)，新的遺傳學研究方法全基因組拷貝數(shù)變異研究(Copy Number Variations，CNV)可用來探究可能的遺傳學機制。既

8、往采用SNP分型芯片（Affymetrix Genme-wide SNP Array6.0）對12例LKS患兒進行了全基因組拷貝數(shù)變異研究，初步發(fā)現(xiàn)了一些可疑的與LKS的發(fā)生有關(guān)的CNV片段，但需要進一步驗證，本研究采用高密度芯片進行比較基因組雜交技術(shù)(CGH)研究，繼續(xù)探究CNV在LKS的發(fā)生中起到的作用。
　　方法:①共收集了20例患兒及9例患兒核心家系的血標本，采用了Gentra(R) Puregene(R)Blood Ki

9、t試劑盒進行DNA抽提;②選用Agilent公司的高密度1×1M和2×400KSurePrint G3 Human CGH芯片對20例患兒及9對家長的DNA進行全基因組拷貝數(shù)變異檢測;③用Agilent Genomic Workbench7.0.4對CNV進行數(shù)據(jù)分析;④與基因組變異的數(shù)據(jù)庫DGV進行比對，尋找罕見的CNV;⑤查閱文獻，進行功能比對，篩選出與LKS的發(fā)生可能有關(guān)的CNV。
　　結(jié)果:1.20例患兒中的19例發(fā)現(xiàn)了共