八肽膽囊收縮素對體外培養(yǎng)大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞保護作用研究.pdf

1、目的： 應(yīng)用SNP作為外源性NO供體，對體外培養(yǎng)的大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞造成過氧化損傷，研究CCK-8S對DRG細(xì)胞的保護作用，并初步探討其作用機制。 方法： 用N2無血清培養(yǎng)基純化培養(yǎng)新生SD大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞，接種后培養(yǎng)72h，隨機分為正常對照組，模型組(200μmol/L硝普鈉損傷)及實驗組(給予SNP損傷+CCK-8S處理，又根據(jù)CCK-8S濃度不同分為實驗組A：CCK．8S為10<'-8>mol/L；實驗組

2、B：CCK-8S為10<'-7>mol/L：實驗組C：CCK-8S為10<'6>mol/L)。各實驗組在損傷前先予不同濃度的CCK-8S預(yù)處理30min。各組細(xì)胞在處理后繼續(xù)培養(yǎng)24h。用AO/EB染色觀察細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化、TUNEL檢測細(xì)胞凋亡率、免疫組化檢測NGF及GAP-43蛋白的表達情況。 結(jié)果： (1)AO/EB染色可見模型組中有較多的凋亡細(xì)胞，表現(xiàn)為胞體縮小，突起回縮或斷裂，胞核固縮，并可見到凋亡小體；實

3、驗組C與模型組相比，凋亡細(xì)胞減少，細(xì)胞損傷減輕。 (2)實驗組A的DRG細(xì)胞凋亡率與模型組相比無顯著性差異(P>0.05)；實驗組B、C的DRG細(xì)胞凋亡率較模型組降低(P<0.05)，且CCK-8S濃度越高，細(xì)胞凋亡率越低。 (3)實驗組A的DRG細(xì)胞NGF及GAP-43蛋白的表達與模型組相比無顯著性差異(P>0.05)；實驗組B、C的DRG細(xì)胞NGF及GAP-43蛋白的表達均較模型組高(P<0.05)，且CCK-8濃度