雞組織中鏈霉素殘留檢測(cè)方法的研究.pdf

1、本試驗(yàn)選用吉林德大養(yǎng)雞場(chǎng)一日齡肉仔雞60只進(jìn)行飼養(yǎng)，肉仔雞隨機(jī)分成3組，每組20只，分別作為空白組、空白添加組，供試組取樣材料。飼養(yǎng)7周后分別取不同的組織進(jìn)行不同處理后檢測(cè)。采用柱前衍生化方法、紫外檢測(cè)器的高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)雞組織中鏈霉素的殘留量，優(yōu)化了樣品的前處理方法和高效液相色譜條件(包括流動(dòng)相的組成和流速)，同時(shí)優(yōu)化了前處理過(guò)程中洗脫液和提取液的用量。試驗(yàn)方法的建立主要包括衍生化試劑的選擇、衍生化條件和檢測(cè)波長(zhǎng)的確定、

2、衍生化產(chǎn)物穩(wěn)定性的研究、色譜條件的建立、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備和加標(biāo)回收試驗(yàn)。色譜條件的建立包括對(duì)流動(dòng)相的組成、比例、流速、緩沖液PH值、柱溫和進(jìn)樣量的確定。結(jié)果表明： (1)通過(guò)試驗(yàn)確定了1，2-萘醌-4-磺酸鈉和氫氧化鈉為最佳衍生化試劑，在45℃條件下反應(yīng)10min衍生化完全，并且在252nm波長(zhǎng)處有特征性的最大吸收，衍生化產(chǎn)物在5h內(nèi)相對(duì)穩(wěn)定。 (2)色譜條件通過(guò)對(duì)各項(xiàng)參數(shù)的篩選，表明：流動(dòng)相為V(乙腈)：V(醋酸鹽緩沖液

3、pH=3.3)：V(水)=10：10：80，流速0.3mL/min，緩沖液PH值為3.3，柱溫35℃，檢測(cè)波長(zhǎng)252nm，進(jìn)樣量20μl為最佳檢測(cè)條件。 (3)前處理?xiàng)l件的篩選主要針對(duì)沉淀劑和洗脫液用量不同，篩選最佳用量。結(jié)果表明：采用沉淀劑(5﹪5ml三氯醋酸)沉淀蛋白質(zhì)，洗脫劑(10mL甲醇)洗脫，3種不同組織添加不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí)測(cè)定回收率為添加200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL濃度時(shí)平均回收率分別為75﹪