不同壓力下高壓氧預(yù)處理對(duì)大鼠腦缺血-再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：用改進(jìn)的Zea-Longa法建立大鼠大腦中動(dòng)脈阻斷缺血-再灌注模型(MCAO)，觀察大鼠腦缺血-再灌注24小時(shí)后神經(jīng)行為學(xué)、腦梗塞體積、缺血半暗帶氧化應(yīng)激反應(yīng)水平和缺血半暗帶組織神經(jīng)元凋亡的變化，給予安全范圍內(nèi)不同壓力高壓氧(HBO)預(yù)處理后，觀察其對(duì)上述指標(biāo)的影響，并探討HBO預(yù)處理對(duì)腦缺血組織保護(hù)作用的可能機(jī)制。
　　 方法：48只WISTAR大鼠，體重250-300g，雌雄各半，隨機(jī)分為3組：假手術(shù)組(n=8)；對(duì)照

2、組：MCAO組(n=8)；實(shí)驗(yàn)組：HBO-PC+MCAO組(n=32)。實(shí)驗(yàn)組再按不同的HBO預(yù)處理壓力分為1.5 ATA(0.15MPa)、2.0ATA(0.20MPa)、2.5ATA(0.25MPa)和3.0ATA(0.30MPa)4個(gè)亞組，每組8只。按不同預(yù)處理壓力，每次吸氧1 h、隔天1次、共5次10天連續(xù)完成。最后一次HBO預(yù)處理后24h根據(jù)改進(jìn)的Zea-Longa線(xiàn)栓法制作MCAO-再灌注損傷模型，模型成功的標(biāo)志為大鼠手術(shù)麻

3、醉清醒后Zea-Longa5分制評(píng)分＞2分，評(píng)分＜2分者剔除并立刻補(bǔ)充。缺血2小時(shí)再灌注24h后取大腦皮層缺血半暗帶組織進(jìn)行以下檢測(cè)：(1)采用Zea-Longa5分制評(píng)定大鼠神經(jīng)功能缺損情況和TTC染色法測(cè)量腦梗塞體積。(2)測(cè)定脂質(zhì)過(guò)氧化物產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量、同時(shí)測(cè)總超氧化物歧化酶(總SOD)和過(guò)氧化氫酶(CAT)等抗氧化酶的活力。(2)用TUNEL法和免疫組織化學(xué)法檢測(cè)大鼠腦皮層缺血半暗帶神經(jīng)細(xì)胞凋亡水平和凋亡促進(jìn)酶Casp

4、ase-3及凋亡抑制蛋白bcl-2的表達(dá)水平。假手術(shù)組和MCAO組不進(jìn)行HBO或常壓氧治療，10d后處理同實(shí)驗(yàn)組。
　　 結(jié)果：與對(duì)照組比較(1)各實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物行為改善，腦梗塞灶體積縮小。(2)各實(shí)驗(yàn)組MDA含量均不同程度下降，總SOD和CAT水平均不同程度的增高。(3)各實(shí)驗(yàn)組腦缺血半暗帶凋亡細(xì)胞數(shù)和Caspase-3陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)不同程度降低，bcl-2表達(dá)不同水平增高，與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。而在2.0A

5、TA和2.5ATA壓力條件下相比較1.5ATA和3.0ATA上述檢測(cè)指標(biāo)差異亦有顯著性(P＜0.05)；并且2.0 ATA和2.5 ATA間，1.5ATA和3.0ATA間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：(1)高壓氧預(yù)處理可能通過(guò)上調(diào)抗氧化酶活性減輕局灶性腦皮層缺血-再灌注缺血半暗帶的自由基損傷和神經(jīng)元凋亡。(2)另外高壓氧預(yù)處理可能通過(guò)下調(diào)皮層缺血半暗帶神經(jīng)元線(xiàn)粒體水平的凋亡反應(yīng)減輕大鼠腦缺血-再灌注損傷。1.