桂枝解郁膠囊的藥學(xué)研究.pdf

1、目的：優(yōu)化桂枝解郁方合理的提取與精制工藝，建立桂枝解郁膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，考察制劑的穩(wěn)定性，為研制治療抑郁癥的中藥新藥奠定研究基礎(chǔ)。
　　方法：本研究以國家新藥注冊的技術(shù)要求為指導(dǎo)，先采用藥效學(xué)方法篩選桂枝解郁方提取工藝，再用正交設(shè)計優(yōu)選出最佳提取工藝；在提取工藝的優(yōu)化研究中，以芍藥苷的提取率和總固體得率為指標(biāo)，采用正交實驗優(yōu)化其水提的工藝條件；為減少服用量，以芍藥苷的損失率為指標(biāo)，考察其水提液的醇沉工藝條件；以耐斯糖、甘草苷、甘草酸

2、的提取率和總固體得率為指標(biāo)，采用正交實驗優(yōu)化其醇提的工藝條件；同時，對用《中國藥典》方法與實驗優(yōu)化的提取方法進(jìn)行比較，說明巴戟天、甘草提取方法的合理性；以揮發(fā)油的提取量為指標(biāo)，采用單因素實驗及正交設(shè)計考察了桂枝揮發(fā)油的提取工藝條件，以保證揮發(fā)油提取完全；采用研磨法，以揮發(fā)油包封率、包合物得率為指標(biāo)，采用正交實驗研究桂枝揮發(fā)油最佳包合工藝參數(shù)，并以高效液相色譜法測定包合物中桂皮醛的含量；在成型工藝中，對提取液濃縮條件、干燥工藝、輔料的選擇

3、、膠囊的填充等進(jìn)行了考察。
　　為了控制產(chǎn)品的質(zhì)量，采用薄層色譜法對制劑中的桂枝、白芍、巴戟天、甘草進(jìn)行了鑒別，并建立了HPLC法對其中的主藥桂枝中的桂皮醛、白芍中芍藥苷進(jìn)行定量分析。
　　在穩(wěn)定性的試驗研究中，開展了加速試驗與長期試驗。制劑的初步穩(wěn)定性試驗，模擬市售包裝的三批樣品，在溫度40℃±1℃、相對濕度75％±10%的條件下放置，在規(guī)定的時間取樣，按照考察項目進(jìn)行檢測。長期實驗采用在接近藥品的實際貯存條件下進(jìn)行，供試

4、品3批，市售包裝，在溫度25℃±2℃、相對濕度60%±10%的條件下放置12個月，在規(guī)定的時間取樣，按穩(wěn)定性重點考察項目進(jìn)行檢測。
　　結(jié)果：用藥效學(xué)方法篩選桂枝解郁方提取工藝的實驗中，工藝4組，即巴戟天和甘草采用乙醇提取、其余藥材用水提取，所制提取液對“行為絕望”動物模型的抗抑郁作用顯著，在小鼠懸尾與小鼠強(qiáng)迫游泳兩項實驗中均能顯著減少小鼠不動時間。實驗研究表明，桂枝解郁方采用適當(dāng)?shù)奶崛」に囂幚砗?，保持了原藥方的藥效，實驗為提取?/p>

5、藝的研究奠定了基礎(chǔ)；本實驗優(yōu)化的提取與精制工藝為水提醇沉法，即白芍等藥加10倍量的水，提取2次，每次1.5h，合并提取液，濾過，濾液濃縮成1.10（26℃）的清膏，用60%濃度的乙醇進(jìn)行醇沉除雜。對巴戟天和甘草采用醇提工藝，優(yōu)化的提取工藝條件為，加藥材量12倍體積的30%乙醇，提取3次，每次1.5h。以耐斯糖、甘草苷、甘草酸的提取率為指標(biāo)，實驗確定的提取工藝條件與《中國藥典》的提取方法相比較，優(yōu)化的提取工藝較藥典方法提取率高。通過正交試

6、驗設(shè)計優(yōu)化的桂枝揮發(fā)油的提取工藝為A1B3D3，即水體積與藥材量為6:1、提取時間為5h、浸泡時間為2h，優(yōu)化出的提取工藝穩(wěn)定可靠；實驗確定的研磨法制備揮發(fā)油包合物的工藝為：β-CD與加水量為10∶4，包合時間為0.5h，此工藝對揮發(fā)油的包封率高、包合物得率高。本實驗確定的濃縮工藝參數(shù)控制為：溫度55℃~65℃，真空度－0.09Mpa~－0.10Mpa，工藝參數(shù)合理，有效成分轉(zhuǎn)移率高、受熱破壞?。桓鶕?jù)現(xiàn)有實驗條件，本實驗采用減壓干燥，減

7、壓干燥工藝參數(shù)控制為：溫度65℃~70℃，真空度－0.08Mpa~－0.09Mpa，測定干燥前后樣品中各指標(biāo)成分損失少（均損失小于12.0%）；經(jīng)實驗研究，加入浸膏粉量1%的硬脂酸鎂、選用0號膠囊即可滿足膠囊的填充與臨床服用劑量的要求。
　　質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究中，所有鑒別方法，均以陰性對照和相應(yīng)的對照品或?qū)φ账幉倪M(jìn)行試驗，結(jié)果專屬性強(qiáng)，斑點分離清晰，重現(xiàn)性好，可用于本品定性鑒別。含量測定方法中，桂皮醛在0.04319μg~0.8639μ

8、g范圍內(nèi)，進(jìn)樣量與峰面積呈良好線性關(guān)系(r=1.0000)，樣品加樣平均回收率為99.05%，RSD是2.79%；芍藥苷在0.0566μg~1.7μg范圍內(nèi)，進(jìn)樣量與峰面積呈良好線性關(guān)系，r=0.9998，樣品加樣平均回收率為97.75%，RSD是2.39%。
　　穩(wěn)定性加速實驗表明，本品所測各項指標(biāo)均在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的范圍內(nèi)，表明樣品性質(zhì)穩(wěn)定，預(yù)測其保存期相當(dāng)于室溫存放二年。
　　結(jié)論：桂枝解郁膠囊的提取與精制工藝設(shè)計嚴(yán)謹(jǐn)